生物工业下游技术复习精华版---内容少，命中率高.docVIP

第一章 绪论 概念：生物工业下游技术 发酵产品系通过微生物发酵过程、酶反应过程或动植物细胞大量培养获得。从上述发酵液、反应液或培养液中分离、精制有关产品的过程称为下游加工过程(Down stream processing)。它由一些化学工程的单几操作组成，但由于生物物质的特性，有其特殊要求，而且其中某些单元操作一般化学工业中应用较少。 生物工业下游技术的特点： 培养液(或发酵液)是复杂的多相系统，含有细胞、代谢产物和末用完的培养基等。分散在其中的固体和胶状物质，具可压缩性，其密度又和液体相近，加上粘度很大，属非牛顿性液体，使从培养液中分离固体很困难。 培养液中所欲欲提取的生物物质浓度很低，但杂质含量却很高，特别是利用基因工程方法产生的蛋白质常常伴有大量性质相近的杂质蛋白质。 另一个特点是欲提取的生物物质通常很不稳定、遇热、极端pH、有机溶剂会引起失活或分解。 发酵或培养都是分批操作、生物变异性大，各批发酵液不尽相同，要求下游加工有一定的弹性。 一个良好的发酵产品下游加工过程的设计应遵循的基本原则： 1)时间短； 2)温度低； 3)pH适中（选择在生物活性物质的适应范围内)； 4)勤清洗消毒(包括厂房、 设备及管路，特别注意死角，这和传统产品抗生素是一致的) 。 3、按生产过程划分，生物工业下游技术大致可分为4个阶段，以及各阶段的主要目的和常采用的技术： 预处理和固液分离 ：目的是除去发酵液中的菌体细胞和不溶性固体杂质。 初步分离 ：目的是除去与产物性质差异较大的杂质，为后道精制工序创造有利条件。 高度纯化 ：去除与产物的物理化学性质比较接近的杂质。 成品制作 ：成品形式由产品的最终用途决定。 4．选择下游加工工艺的原则：是胞内产物还是胞外产物；原料中产物和主要杂质浓度；产物和主要杂质的物理化学特性及差异；产品用途和质量标准；产品的市场价格；废液的处理方法等。 第二节 发酵液的预处理和处理原则 5．发酵液的预处理的基本目的，以及主要的困难和解决的主要手段。 目的：分离菌体和其他悬浮颗粒(细胞碎片、核酸和蛋白质的沉淀物)；除去部分可溶性杂质和改变滤液性质，以利于提取和精制的顺利进行。 6．发酵液预处理的常用技术 1.降低液体粘度：根据流体力学原理，滤液通过滤饼的速率与液体的粘度成反比，降低液体粘度（加水稀释法和加热法等）可有效提高过滤速率。注意加热温度与时间，不影响产物活性和细胞的完整性。 2.调整pH：pH值直接影响发酵液中某些物质的电离度和电荷性质，适当调节pH值可改善其过滤特性。氨基酸、蛋白质等电点的调节；在膜过滤中，发酵液中的大分子物质易与膜发生吸附，通过调整pH值改变易吸附分子的电荷性质，即可减少堵塞和污染；细胞、细胞碎片及某些胶体物质等在某个pH值下也可能趋于絮凝而成为较大颗粒，有利于过滤的进行。 3.凝聚与絮凝：采用凝聚和絮凝技术能有效改变细胞、细胞碎片及溶解大分子物质的分散状态，使其聚结成较大的颗粒，便于提高过滤速率。另外，还能有效地除去杂蛋白和固体杂质，提高滤液质量。 4.加入助滤剂：一种不可压缩的多孔微粒，它能使滤饼疏松，滤速增大。悬浮液中大量的细微胶体粒子被吸附到助滤剂的表面上，改变了滤饼结构，降低了过滤阻力。常用的助滤剂有： 硅藻土、纤维素、石棉粉、白土、炭粒、淀粉等，最常用的是硅藻土。使用硅藻土时，通常细粒用量为500 g/m3；中等粒度用量为700 g/m3；粗粒用量为700-1000 g/m3。 5.加入反应剂：加入反应剂和某些可溶性盐类发生反应生成不溶性沉淀，如CaSO4，AlPO4等。生成的沉淀能防止菌丝体粘结，使菌丝具有块状结构，沉淀本身可作为助滤剂，且能使胶状物和悬浮物凝固，改善过滤性能； 如发酵液中含有不溶性多糖物质，用酶将其转化为单糖，以提高过滤速率。如万古霉素用淀粉作培养基，发酵液过滤前加入0.025%的淀粉酶，搅拌30min后，再加2.5%硅藻土助滤剂，可提高过滤效率5倍。 7．影响发酵液过滤速度的因素及改善过滤性能的方法。 过滤速度和以下因素有关： （1）菌种； （2）发酵条件：培养基的组成；未用完培养基的数量；消沫油；发酵周期。 改善过滤性能的方法：等电点；蛋白质变性；吸附；凝聚和絮凝；加入助滤剂；直接在发酵液中形成填充-凝固剂；酶解作用 8．碟片式离心机/管式离心机的工作原理，其主要特点（优缺点）。 碟式离心机是立式离心机的一种，转鼓装在立轴上端，通过传动装置由电动机驱动而高速旋转。转鼓内有一组互相套叠在一起的碟形零件--碟片。碟片与碟片之间留有很小的间隙。悬浮液（或乳浊液）由位于转鼓中心的进料管加入转鼓。当悬浮液（或乳浊液）流过碟片之间的间隙时，固体颗粒（或液滴）在离心机作用下沉降到碟片上形成沉渣（或液层）。沉渣沿碟片表面滑动而脱离碟片并积聚在转鼓内直径最大的部位，分离后