酶免疫技术专题知识宣教;第二节酶免疫技术的分类
一、均相酶免疫测定
二、非均相酶免疫测定
第三节 酶联免疫吸附试验
一、基本原理
二、方法类型及反应原理;放射免疫技术;第一节 酶免疫技术的特点;主要试剂:
酶标记的抗体或抗原
酶标物特点:
免疫学活性
酶对底物的催化活性;特点:
灵敏度高、特异性强、准确性好
酶标记试剂能够较长时间保持稳定
操作简便、对环境没有污染。
易与其它技术偶联
衍生出适用范围更广的新方法。;标记酶的要求:
活性高
性质稳定
专一性强
酶催化底物的显色信号易于判断和测量
方法敏感,重复性好,简单易行
酶的底物易于配制保存,酶及底物价廉
;辣根过氧化物酶(HRP) ;
碱性磷酸酶(AP)
;HRP的底物 ;HRP的常见底物 ;OPD反应后显橙黄色,加酸终止反应后呈棕黄色,测定波长492nm。不稳定,致癌性。;AP的
底物 ;酶免疫技术的核心组成部分 ;抗原要求纯度高,抗原性完整 ;制备方法要求;制备方法;戊二醛交联法;纯化及鉴定;固相抗体或抗原是非均相酶免技术中将游离和结合的酶标记物迅速分离的最常用方法 ;要求 ;将抗原或抗体结
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