1.2-基因工程的基本操作程序.pptVIP

1.2 基因工程的基本操作程序 专题1 基因工程 复制与转录 原核细胞的基因结构 真核细胞的基因结构 真核基因的表达 原核细胞与真核细胞的基因结构比较 基因工程基本操作的四个步骤 一、目的基因的获取 二、基因表达载体的构建 三、将目的基因导入受体细胞 四、目的基因的检测与鉴定 小结 获取目的基因 从基因文库中获取目的基因 利用PCR技术扩增目的基因 通过DNA合成仪用化学方法人工合成目的基因 构建基因表达载体 目的基因、启动子、终止子、标记基因、（复制原点） 将目的基因导入受体细胞 植物细胞、动物细胞、微生物细胞 目的基因的检测与鉴定 检测：是否插入、转录、翻译 鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等 练习 The End.Thank you! 基因组文库的构建 cDNA文库的构建 条件对比 与原核细胞比较，真核细胞基因结构的主要特点是： 编码区是间隔的、不连续的。也就是说，能够编码蛋白质的序列被不能够编码蛋白质的序列分隔开来，成为一种断裂的形式。 其中，能够编码蛋白质的序列叫做外显子，一般不能够编码蛋白质的序列叫做内含子。 高温变性（90~95℃） 低温退火（55~60℃） 中温延伸（70~75℃） 多次重复循环 启动子：位于基因的首端的一段特殊的DNA片断，它是RNA聚合酶识别和结合的部位，有了它才能驱动基因转录出mRNA，最终获得蛋白质