遗传学实验-果蝇交实验实验报告.docVIP

PAGE PAGE 5 传学设计性实验报告 实验名称 果蝇杂交实验 学 院 生命科学学院 专 业 生物技术 班级名称 学生姓名 学 号 任课教师 完成日期 2015年11月15日 教 务 处 制 1前言 1.1 实验目的 通过实验验证分离规律、自由组合规律、伴性遗传和连锁互换规律，掌握果蝇杂交的实验技术和基因定位的三点测验方法，在实验中熟练运用生物统计的方法对实验数据进行分析。 1.2 实验原理 果蝇（fruit fly）是双翅目（Diptera）昆虫，属果蝇属（genus Drosophila），约有3000多种，我国已发现800多种。大部分的物种以腐烂的水果或植物体为食，少部分则只取用真菌，树液或花粉为其食物。以果蝇作为遗传学研究的材料，利用突变株研究基因和性状之间的关系已近一百年，至今，各种研究遗传学的工具已达完善的地步，果蝇对今日的遗传学的发展有其不可磨灭的贡献；从1980年初，Drs. C. Nesslein-Volhard和E. Weichaus以果蝇作为发育生物学的模式动物，利用其完备的遗传研究工具来探讨基因是如何调控动物体胚胎的发育，也带动了其它模式生物（线虫、斑马鱼、小鼠和拟南芥等）的研究，且有非常具体的成果。 通常用作遗传学实验材料的是果蝇。用果蝇作为实验材料有许多优点： ⑴饲养容易。在常温下，以玉米粉等作饲料就可以生长，繁殖。 ⑵生长迅速。十天左右就可完成一个世代，每个受精的雌蝇可产卵400～500个，因此在短时间内就可获得大量的子代，便于遗传学分析。 ⑶染色体数少。只有4对。 ⑷唾腺染色体制作容易。横纹清晰，是细胞学观察的好材料。 ⑸突变性状多，而且多数是形态突变，便于观察。 果蝇的性别及突变性状的鉴别： 果蝇的每一体细胞有8个染色体（2n=8），可配成4对，其中3对在雌雄果蝇中是一样的，称常染色体。另外一对称性染色体，在雌果蝇中是XX，在雄蝇中是XY。 果蝇的雌雄在幼虫期较难区别，但到了成虫期区别相当容易。雄性个体一般较雌性个体小，腹部环纹5条，腹尖色深，第一对脚的跗节前端表面有黑色鬃毛流苏，称性梳（Sex combs）。雌性环纹7条，腹尖色浅，无性梳。 实验中选用的果蝇突变性状一般都可用肉眼鉴定，例如红眼与白眼，正常翅与残翅等。 2 实验材料 2.1果蝇品系 正交：2# （雌） ×6＃（雄） 反交：2# （雄） ×6＃（雌） 2.2实验用具、药品 显微镜、培养瓶、棉塞、量筒、麦片、玉米粉、蔗糖、琼脂粉、丙酸、乙醚等 3实验方法 3.1、果蝇的饲养 3.1.1 培养基的配制（以100ml量为例） 70ml水 + 0.85g琼脂 + 7g蔗糖 煮开至琼脂溶化 加入麦片玉米糊（30ml冷水与8g麦片玉米混匀） 煮开约5分钟，成粘稠的糊状 稍凉后加入1g酵母粉，0.4-0.5ml丙酸，混匀 分装，待培养基凝固后包上纱布 3.1.2 果蝇的生活史 果蝇的生活周期长短与温度有密切关系。一般来说，30℃以上温度能使果蝇不育或死亡，低温能使生活周期延长，生活力下降，饲养果蝇的最适温度为20～25℃。 生活周期长短与饲养温度的关系 10℃ 15℃ 20℃ 25℃ 卵→幼虫 幼虫→成虫 57天 18天 8天 6天 5天 4天 果蝇在25℃时，从卵到成蝇需10天左右，成虫可活26～33天。果蝇的生活史如下： 成虫交配1天后 产卵，1天孵化为一龄幼虫 1-1.5天后，成为二龄幼虫 1天后，成为三龄幼虫 2.5-3.5天后，成蛹 3.5-4.5天后，羽化成虫 羽化后的成虫一般要经过至少12小时才能交配，此时的成虫又称为处女蝇；温度越低，生活周期越长，25℃平均10－12天一个世代；但超过30℃ 易出现变异；其生活习性：果蝇是以水果上的酵母为食，所以实验室内凡能发酵的基质都可作为果蝇的饲料。 3.2、果蝇杂交的流程 3.2.1 取原种培养，并标注清楚 3.2.2 7-8天后，出现较多黑色蛹时，把原种分离出来。 3.2.3 待羽化后，每隔8小时取一次处女蝇。 3.2.4 严格分离雌蝇与雄蝇，若雌蝇中混有雄蝇，则需要重新取处女蝇；若雄蝇中混有雌蝇，则除去雌蝇。 3.2.5 交换6号雄与2号雄，进行杂交，分别为：正交：2# （雌） ×6＃（雄） 反交：2# （雄） ×6＃（雌） 出现第一个蛹后，去除亲本，等待F1代成虫的出现 3.2.7 统计F1代性状 4 实验结果 表1 6# × 2#果蝇杂交F1实验结果 2#♀×6#♂ 2#♂×6#♀ ♀ ♂