分子生物学与临床医学知识学习.ppt

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HCV的诊断及预防 检查病毒RNA 检测抗HCV 因HCV免疫原性不强及变异,目前尚无可用疫苗 HCV的诊断及预防 丙型肝炎病毒:中国普通人群抗 HCV抗体的阳性率为3 2% 全世界约1 7亿人感染了HCV 目前除了干扰素α(IFN α)或其与利巴韦林联合应用对部分患者有一定疗效 疫苗研究:由于HCV包膜糖蛋白E2中和性抗原位点存在高变区1(HVR1)进展甚微 HCV抗原表位:线性表位、空间表位。如果以HCV特异性抗体对化学合成的随机噬菌体多肽库进行筛 选,则很难筛选到与原始的抗原序列完全一致的序列,而是获得大量与原始抗原序列完全不同的多肽片段。这种一级结构序列与原始抗原不同,又保留其抗原反应性的抗原表位,称为模拟表位(mimotope)。从其结构而言,模拟表位多数是构象表位(conformationalepitope),即空间表位。 噬菌体表面展示技术的建立和应用促进了HCV抗原模拟表位的研究。国外学者应用噬菌体表面展示技术筛选获得了HCV不同的结构和非结构蛋白抗原的模拟表位。这些研究结果首先在免疫学理论上阐明了抗原 抗体分子之间相互对应的多样性的问题,同时由于模拟表位的抗原性较强,且具有广谱性,因此,在新型诊断试剂和广谱疫苗的研究中具有重要的应用前景。 HCV的诊断及预防 丙型肝炎病毒感染的诊断,第三代血清学检测试剂——较好的敏感性和特异性,但20%患者可不出现抗体,或有的患者抗体存在时间可以很长 现行感染,早期诊断——因此,核酸检测在HCV感染的诊断中要比HBV感染的诊断重要得多。 ? 丁型肝炎病毒(hepatitis D virus,HDV) HDV是一种缺陷病毒 由HBsAg构成其外壳 HDV定位于肝细胞核内,在血液中由HBsAg包被,形成35-37nm颗粒 单负链环状RNA HDV的结构 Rizzetto于1977年首先发现,又称? 抗原 35-37nm球形颗粒; 1.7Kb-ssRNA 含9个ORF 丁型肝炎的特点 只能感染HBsAg阳性的病人 我国丁肝感染率在1.6%-5%,西南地区感染率高 患者可不定期隔离,或隔离至肝功能正常,或HBsAg阴转。 病原学检查为HDAg、抗HD及HDV-RNA,持续高滴度IgG型抗HD是慢性HDV感染的主要血清学标志。一旦乙肝患者感染了HDV,尤其是在慢性乙肝的基础上感染,容易发展成为重度慢性乙肝、重型肝炎,甚至肝硬化。 微生物学检查及预防 诊断为检测抗-HD HDV-RNA 丁型肝炎传播途经与乙型肝炎相似。传播途径和防治原则似HBV。 戊型肝炎病毒(hepatitis E virus,HEV) 球形,无包膜 直径32~34nm 单正链RNA,3个ORF 两个血清型 致病性及免疫 主要为粪-口途径传播 由胆汁经粪便排出体外 对肝细胞的直接损伤及免疫病理作用 多表现为急性戊型肝炎 孕妇感染常致流产 戊型肝炎的特点 与甲型肝炎相比,患者黄疸前期症状重,病程持续时间较长,病死率较高,特别是孕妇感染HEV后。青壮年是HEV最喜欢攻击的人群。 戊型肝炎分两种:“流行性” 多发生在雨季和洪水后, “散发性” 在秋冬季呈现高峰。 传染性强的时间在患者将要出现症状前(潜伏末期)至发病初期,患者的隔离期为起病后3周。 尚末发现有2次发病者。 微生物学检查及预防 检测HEV:EM或IEM 检测抗-HEV IgM HEV RNA 预防与甲肝类似 TLMV病毒(TTV-liked mini virus, TLMV) :2000年Takahashi TTV-DNA引物作PCR,检测抗-HCV阳性血浆,10份TTV DNA滴度105拷贝/ml,其中3份(分别为CBD231、279和203)血浆PCR产物的长度较预期为短(约1.2kb),该病毒的全长DNA序列较TTV为短,分别为2 860nt(CBD231株)、2 856nt–BD279株)和2 897nt(CBD203株),证明是一种新病毒,命名为TTV样微小病毒(TTV-like mini virus,TLMV). 准种的研究:集中在RNA病毒(RNA病毒变异大,复制快,短时间内感染个体中即可形成一个彼此密切相关的异质性病毒群体.) HCV和HIV 病毒的准种特性:实质是进化的一种生存优势,病毒最大限度地制造自己的大量变异序列,这些序列中可能包括了潜在有用的变异体,对抗病毒制剂有抵抗能力 能逃避CTL攻击和诱导免疫耐受的突变体. 这样当环境改变后病毒可以快速的作出反应,从而保证其在宿主体内的生存 最近的研究还发现病毒准种象人体免疫系统一样具有记忆能力,当准种再次遇到经历过的环境作用时,保存在突变谱内的少量病毒株将迅速大量复制成为准种的主导序列.因此如果病毒准种的复杂性越大,治疗难度就可能越大. 在HCV的研究中已发现,病毒准种的异

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