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Xt2000i白细胞分类计数作业指导书
1. 实验原理
本实验采用半导体激光器,以核酸荧光染色及流式细胞术原理分析白细胞。当全血进入白细胞通道后,通过核酸荧光染色、利用流式细胞技术半导体激光的照射形成白细胞散射图,从而计算出中性细胞、淋巴细胞,单核细脃、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞分类的数量。
2. 标本采集:
2.1 标本种类:新抽取的凝血或手指末梢血
2.2 标本要求:
2.2.1 抗凝剂采用EDTA K2抗凝
2.2.2 用手指末梢血作白细胞检验时,最少样品量为200ul,如手指有冻疮,则主张采用耳垂血。
3. 标本储存
2小时内完成检验,室温放置下不超过8小时,4-8℃保存不超过48小时。
4. 标本运输:室温运输
5. 标本拒收标准:污染,凝固标本不能作测定
6. 试剂
6.1试剂名称:sysmex血细胞分析试剂
6.2 生产厂家:希森美康株式会社
6.3 试剂组成
试剂1:嗜碱细胞溶血素
试剂2:嗜碱细胞溶血素
试剂3:白细胞分类染液
试剂4:稀释液
6.4 试剂储存条件及有效期:储存温度为5-30℃,有效期为一年,开封后的使用期限为60天。
7. 仪器设备
7.1 仪器名称:sysmex血细胞分析仪
7.2 仪器厂家:日本sysmex株式会社
7.3 仪器型号:XT-2000i
8. 操作步骤
8.1 手工模式:
8.1.1 上下颠倒试管将内容物充分混匀。
8.1.2 轻轻取下盖子,防止血液溅出。
8.1.3 将试管正确放入手工吸引管,吸引管浸入样品。
8.1.4 按start键,样品开始吸取。
8.1.5 当ready led 暗(并发出两声短音)移开试管。
8.1.6 当ready led再次亮起时,准备下一个样品,重复上述步骤。
8.2 进样器模式:
8.2.1 将试管入试管架,将试管架放在进样器的右侧槽中,最多能入5个试管架。
8.2.2 单击sampler start键
9. 结果的分析与判断:在仪器显示屏上将显示结果
10. 质量控制
10.1 三种质量控制品(高、中、低),分别对应三种靶值,做出来的质控品不能超出质控靶值的上下限范围,否则实验无效。
10.2 计算方法
当结果出现差异时用下列方法校正
Coll= (Xct/Zct)×Col2
式中: Coll—新质控调整系数
Col2—原质控调整系数
Xct —质控品靶值
Zct —质控品测得值
11. 参考值范围:白细胞分类(DC):参考值:中性粒细胞0.5~0.70×(50~70%),嗜酸性凿粒细胞0.005~0.05(0.5%~5%)嗜碱性粒细胞0~0.01(0~1%),淋巴细胞0.2~0.40(20%~40%)和单核细胞0.03~0.08(3%~8%)。
12. 临床意义:中性粒细胞增多见于急性化脓性细菌感染、粒细胞白血病、急性出血、溶血、手术后和尿毒症等;其减少见于伤寒和副伤寒、疟疾、粒细胞缺乏症、放射性辐照和肿瘤化疗。嗜碱性粒细胞增多见于过敏性疾病、寄生虫病等;其减少见于伤寒和副伤寒等。嗜碱性粒细胞增多见于慢性粒细胞白血病、何杰金氏病和铅中毒等。淋巴细胞增多见于病毒感染,其减少见于免疫缺陷病。单核细胞增多见于某些细菌感染及单核细胞白血病等。
13. 当检验系统(仪器)不能工作时,所采取的补救措施:当检验系统(仪器)不能工作时,可联系厂家,进行紧急修理,如一时不能修好,如别的实验室有同类仪器,可到别的仪器先检验,如别的实验室无同类仪器,申请厂家送一台正常的代替。
14. 参考文献
14.1叶应妩,王毓三,等,全国临床检验操作规程,第二版,东南大学出版社,1997,169-173
14.2 SySmex XT-2000i中文操作说明书
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