MALDI_TOFTOF在蛋白质组学中的应用介绍.doc

布鲁克公司MALDI TOF/TOF 解决方案 PAGE PAGE 12 MALDI-TOF/TOF质谱的原理及其在临床蛋白质组学中的应用 目 录 一、MALDI-TOF/TOF质谱的基本原理 二、布鲁克公司MALDI-TOF/TOF质谱的仪器特点和性能优势 宽域离子聚焦PAN?专利技术 靶上浓缩AnchorChip?专利技术 全新的离子源自动清洗SourceShower? 专利技术 氮气激光与固体激光优点完美结合的Smartbeam?激光专利技术 激光光束的直径大小可调 支持所有同位素标记技术 Top-down测序技术 三、解决方案 解决方案一：双向电泳-MALDI TOF/TOF技术路线 解决方案二：LC-MALDI TOF/TOF技术路线 解决方案三：ClinProt液体芯片- MALDI TOF系统 解决方案四：MALDI分子成像技术 解决方案五：MALDI Biotyper微生物快速鉴定与分类 四、参考文献 一、MALDI-TOF/TOF质谱的基本原理 MALDI-TOF/TOF质谱主要由MALDI离子源和飞行时间质量分析器TOF组成。样品在离子源内受激光的轰击而电离,受加速电场的作用获得一定的动能后,在无电场的真空管内飞行,不同质量的离子在飞行管内的飞行时间不同，通过测量离子的飞行时间即可测得离子的质量。它不仅可以通过一级质谱模式测得多肽和蛋白质等分子的质量，还可通过二级质谱模式测得多肽的序列。 布鲁克公司是当今世界上唯一专门生产高性能生物质谱的公司，仅MALDI TOF/TOF系列的仪器就至少有六种型号。其中, Autoflex Speed MALDI TOF/TOF是目前最先进的MALDI-TOF/TOF质谱仪。它不仅在硬件上具有布鲁克公司的多项专利技术，还提供了很多独特的分析软件,为临床医学研究人员提供了蛋白质组学研究方向的多种解决方案。除了通过经典的以二维电泳为分离手段的双向电泳-MALDI TOF/TOF技术路线和以液相色谱为分离手段的LC-MALDI TOF/TOF技术路线，进行表达蛋白质组学或差异蛋白质组学研究以外，它还在临床医学研究的具有广泛的应用，如发现与鉴定生物体液（如血清）中生物标志物的ClinProt技术，用于发现和监测组织中生物标志物的MALDI分子成像技术，用于临床微生物快速鉴定与分类的BioTyper技术,都是布鲁克公司独家提供的医学蛋白质组学解决方案。 Autoflex Speed 是当今世界最先进的MALDI TOF/TOF，由高能碰撞池和两级TOF组成。它打破了三重四极杆等仪器采用的“先选择母离子，然后碰撞打碎母离子，再检测碎片离子”的传统串联质谱模式，巧妙地利用了TOF检测器的特点，采用“先碎裂母离子，再选择检测母离子及其碎片离子”的方式，从而使串联质谱一气呵成，无需离子的减速过程，避免了其它产家的MALDI TOF/TOF在进行串联质谱时，离子先加速，选择母离子，然后减速，打碎后再加速等多步过程造成的离子信号损失。其工作原理看似不好理解，其实也很简单，根据在飞行管中飞行的母离子在碎裂前后飞行时间不变的性质，先打碎母离子，并不影响对母离子及其碎片离子的选择及检测。 Autoflex Speed型MALDI-TOF质谱仪检测范围宽，分析速度快，分辨率和灵敏度高等优点，具有非常广泛的应用范围。Bruker公司独创的smartbeam激光技术，吸收了氮气激光器的优点，克服了全固态激光器的缺点，大大扩展了其应用范围。它不仅适用于高通量的蛋白质组分析鉴定，还可进行血清临床蛋白质组分析、微生物快速鉴定、组织切片成像分析，更可利用独特的ISD和T3测序技术进行蛋白质的Top-down直接测序和蛋白质末端序列分析。 它采用的实时校准技术克服了TOF检测器易受环境温度变化而导致质量漂移的缺陷，保证了质量准确度的稳定性。它采用的宽域离子聚焦技术保证了在很宽的质量范围内同时获得高分辨率和高准确度，充分满足蛋白质组研究的需要，是蛋白质组研究不可或缺的工具。 二、布鲁克公司MALDI-TOF/TOF质谱的仪器特点和性能优势 宽域离子聚焦PAN?专利技术：可同时在很宽的质量范围内得到超高分辨率和宽范围内极高质量精度 靶上浓缩AnchorChip?专利技术：提高分析灵敏度10-100倍 全新的离子源自动清洗SourceShower? 专利技术：不仅保证了仪器的持续运行和长期灵敏度，还大大缩短了清洗时间，方便了仪器的维护 氮气激光与固体激光优点完美结合的Smartbeam?激光专利技术：对所有的基质都有很好的通用性，不局限于CHCA ；Smartbeam?激光频率可在1-1000Hz范围调节，分析速度更快，充分满足分子成像和LC-MALDI分析的需要。 激光光束的直径10-100μm大