第六章沉淀法和吸附法.pptVIP

第六章 沉淀法和吸附法;(一)盐析法 (二)有机溶剂沉淀法 (三)等电点沉淀法 (四)生成盐复合物沉淀法;一、 沉 淀 法;①盐析法:多用于分离纯化各种蛋白质和酶。 ②有机溶剂沉淀法：多用于生物小分子、多糖及核酸等 产品的分离纯化，也有用于蛋白质的沉淀。 ③等电点沉淀法：用于氨基酸、蛋白质及其他两性物质 的沉淀。 ④生成盐复合物沉淀法：用于多种化合物，特别是小分 子物质的沉淀。;(一)盐析法;盐析机理示意图 ;盐离子与蛋白质分子争夺水??子，降低了用于溶解蛋白质的有效水量，减弱了蛋白质的水合程度，破坏了蛋白表面的水化膜，导致蛋白质溶解度下降； 盐离子电荷的中和作用，使蛋白质溶解度下降； 盐离子引起原本在蛋白质分子周围有序排列的水分子的极化，使水活度降低。;碳氧血红蛋白的溶解度与硫酸铵离子强度的关系图 pH6.6，温度25℃，logS0=17g·L-1;不同蛋白质的溶解度曲线;蛋白质的盐析分布曲线;溶解度曲线(a)和盐析分布曲线(b) ;蛋白质起始浓度的影响;无机盐种类的影响;温度的影响;pH对β的影响;二次盐析;(二)等电点沉淀法;(二)等电点沉淀法;许多无机酸的价格低廉，并能为食品标准允许。;等电点沉淀实例;等电点沉淀实例;(三)有机溶剂沉淀法;有机溶剂沉淀原理图;分辨能力比盐析法高 一种溶质只在一个比较窄的有机溶剂范围内沉淀 沉淀不需脱盐 有机溶剂密度低，与沉淀物密度差大， 容易进行固液分离 有机溶剂容易蒸发，不会在成品中残留， 因此适用于食品、药品的制备。;容易引起蛋白质变性失活 有机溶剂易燃、易爆，对安全要求较高 需冷却、降温、低温操作。;2、影响有机溶剂沉淀的因素;样品浓度和分子质量：低浓度样品需用有机溶剂的量较大，但共沉作用小，有利于提高分离的效果；但低浓度样品损失较大，回收率低，具有生理活性的样品容易产生稀释变性。 金属离子和离子强度：Mn2+、Fe2+、Co2+、Zn2+等阳离子能与蛋白质中的羧基、氨基和含有氮杂环的化合物结合，形成难溶复合物，有利于沉淀。但离子强度过大，不利分离。;3、有机溶剂沉淀实例;（四）生成盐复合物沉淀——柠檬酸钙盐沉淀;1、工艺流程：;3、中和与酸解;4、生产设备及操作;(一)吸附过程的基础理论 (二)吸附类型 (三)影响吸附过程的因素; 选择性吸附法用于：分离精制各种产品、空气的 净化、除菌、脱色、除热源、去组胺???杂质。 吸附作用：物质从流体相(气体或液体)浓缩到固体表面 的过程。 吸附剂：在表面上能够发生吸附作用的固体。 吸附物：被吸附的物质。; 吸附作用力也是范德华力。它是一组分子引力 的总称，包括三种力，即定向力、诱导力和色散力。;色散力：是非极性分子之间的引力，当分子外围电子运动 及原子核在零点附近震动，正负电荷中心出现瞬 时相对位移时，产生快速变化的瞬时偶极矩，能 使外围非极性分子极化，反过来又影响瞬时偶极 矩的变化而产生这种色散力。与温度无关。 此外，还有氢键力，这是介于库仑引力和范德华力之间的定向力，比诱导力和色散力都大。;(二)吸附类型;2、化学吸附;（三） 影响吸附的因素;吸附剂的性质：容量大、速度快、机械强度高 吸附物的性质：极性宜从非极性中吸附极性物 溶液pH的影响：非极性宜从酸性中吸附有机酸 温度的影响：吸附热越大，受温度影响越大 溶液中其他溶质的影响：一般使吸附量下降;作 业