生物化学第三章 酶.ppt

第三章 酶 Enzyme 酵素的发现 公元前9000年已有面包，但酵母的发现却在公元前2000年左右。尼罗河流域盛产小麦，古埃及人将小麦磨成粉，加入水、马铃薯及盐拌在一起，摆在温热的地方，空气中的酵母落入一块未被烤过的面团中，面团竟慢慢地涨大起來，这种面团烤出来后非常松软，从此人们便故意留一块面团，让酵母慢慢使它发大、变酸，再取一团作“面种”留待下次发面包。 古埃及人只知道方法，却不懂得其原理，因此一直认为这是神在暗中帮忙，而认定面包是“神的赠礼” enzyme ("in yeast") enzyme是希腊文 en = in ， zyme = yeast 二、酶催化特性 与一般催化剂相同的特点 1、提高反应 速度，不改变平衡点； 2、只起催化作用，本身不消耗； 3、 降低反应的活化能 生物催化剂的特点 酶对底物的选择性称为～或特异性 Trypsin ：R1=赖氨酸Lys（K）和精氨酸Arg（R）（专一性较强，水解速度快）。 R2=Pro（抑制） Pepsin：R1和R2＝R1=苯丙氨酸Phe（F）,色氨酸Trp,（W）酪氨酸Tyr（Y）; 亮氨酸Leu（L）以及其它疏水性氨基酸水解速度较快。 R1=Pro（抑制） 分别从肽链羧基端和氨基端水解 （三）体内酶活性受到调控 第二节 酶的化学结构 （一）酶的化学组成: 酶活性部位的特点 1、几个残基+辅助因子（单纯、结合） 2、在空间构象上集中到一起（单体、寡聚） 3、疏水空穴 4、活性中心构象具有柔韧性和可塑性 结合中心——与底物结合的部分 决定酶促反应的专一性催化中心——促进底物发生化学变化 决定酶促反应的性质 酶的活性中心有时有几个酶的催化中心一般只有一个  酶原存在的意义 消化道内蛋白酶以酶原的形式分泌，避免细胞产生的蛋白酶对细胞进行自身消化，并使酶在特定的部位和环境中发挥作用； 胰腺炎 酶原可视为酶的贮存形式，在机体需要的时候才被激活发挥作用。 第四节 酶催化机理 中间络合物的实验证据：1. ES已被电子显微镜和X射线晶体结构分析2. E和S的光谱特性在形成ES后发生变化3. E的物理性质（如溶解度和热稳定性）在 形成ES后发生变化4. 已分离得到ES 一 、酶活力测定 酶活力就是酶催化反应的能力。 人的能力——能办多大的事 酶的活力——能催化多快的反应 通常以测出的酶促反应速度表示酶的活力； 提问：为 什么用反应初速度表示酶活力？ ——酶活力单位标准化（1）国际单位（IU）  在标准条件下（25 ℃ ，最适pH和最适底物浓度）一分钟内催化1微摩尔底物转化为产物所需的酶量。  1 IU= 1 ?mol / min ——酶活力单位标准化 （2）Kat 在标准条件下（25 ℃ ，最适pH和最适底物浓度）每秒钟催化1摩尔底物转化为产物所需的酶量。 1 Kat =1 mol/s = 6×107 IU 三、比活力酶产品质量评价中常使用比活力单位质量酶产品中酶活力称比活力。 u/mg酶蛋白  u/ml酶蛋白u/ug酶蛋白 第六节 酶促反应动力学 3、 变构酶的生理意义 （1） S曲线中段，在很小的浓度（底物、调节物）范围内严格控制酶活力，因此是生物代谢中许多关键反应的酶。一般位于代谢途径的第一步。 （2）变构抑制剂 通过反馈抑制，调节代谢速度。 一、酶与动物和人类的健康关系密切 1、缺乏 酪氨酸酶 苯丙氨酸羟化酶 2、抑制 细胞色素氧化酶 巯基酶 3、疾病诊断 4、酶制剂 二、酶在科研中的应用 （一）工具酶 （1）竞争性（Competitive)抑制 I： 抑制剂（ inhibitor） 斜率 斜率 V下降 发生抑制 Km增大 亲和力 Vmax不变 [S] 增大， I结合机率减小 提问：V、Km、Vmax? V下降 Km增大 Vmax不变 竞争性：I与S与酶活性中心结合机会均等 竞争性抑制曲线 利用竞争性抑制是药物设计主要思路 磺胺类药 抗菌机理（与对氨基苯甲酸是结构类似物） —竞争性抑制细菌叶酸形成，进而抑制细菌繁殖 人通过食物中的叶酸直接补充，对人无毒害。 抑制物 Noncompetitive inhibition 截距 V下降 发生抑制 Km不变 亲和力不变 Vmax减小 部分酶失活 V、Km、Vmax? （1）V下降， （2）Km不变， （3）Vmax减小 非竞争性抑制曲线 各种类型抑制的表观Km及Vmax 抑制类型 表观 Vmax 表观 Km 无抑制剂 Vmax Km 竞争