产淀粉酶细菌分离二微生物分离培养和接种方法.pptVIP

2004.6 综合性实验 实验六 产淀粉酶细菌的分离（一） 微生物的分离与培养 河南工业大学微生物学实验室 微生物纯种分离 （一）涂布分离法 微生物纯种分离 （二）划线分离法 微生物纯种分离 （三）定量稀释分离法 1、掌握稀释分离和平板划线获得微生物纯种的方法。 2、学会微生物接种技术。 一、实验目的及要求 二、实 验 原理 从混杂微生物群体中获得只含某一种或某一株微生物的过程称为微生物的分离纯化。平板分离法普遍适用于微生物的分离与纯化，其基本原理是选择适合于待分离微生物的生长条件，如营养成分、酸碱度、温度和氧等要求，或加入某种抑制剂造成只利于该微生物生长，而抑制其它微生物生长的环境，从而淘汰一些不需要的微生物。 本实验采用透明圈检验法检测培养物中是否有产淀粉酶微生物的生长。 三、实 验 器 材 1、材 料：土壤、粮食或者食品。 2、培养基：PDA培养基、营养琼脂培养基。 3、器 皿：三角瓶、移液管、试管、培养皿、玻璃刮铲、酒精灯、接种环等。 4、仪器：电炉、恒温培养箱。 四、实验方法和步骤 1、微生物的纯种分离平板稀释分离法 1、配制所需培养基，无菌水 2、培养基、无菌水、玻璃器皿、无菌室的灭菌 3、制作菌悬液（样品加至无菌水中震荡） 4、菌悬液稀释 5、将一定稀释度的菌悬液1ml加至平皿中 6、加适量培养基至平皿中并与菌悬液混合 7、适温培养 8、挑取独立的菌落 225ml无菌水加25g样品 1ml 1ml 1ml 试管中原始装9ml无菌水 10-2 10-3 10-4 1ml 四、实验方法和步骤 1、微生物的纯种分离 （1）稀释涂布分离法：制平板—制菌悬液—涂布—培养—获得纯种微生物。 （2）平板划线法：制平板—制菌悬液—划线—培养—获得纯种微生物。 四、实验方法和步骤 2、微生物的接种 （1） 斜面接种 五步曲：a. 接种环灭菌 b. 拔棉塞及试管口灭菌 c. 接种 d. 塞棉塞 e. 接种环灭菌 （2） 培养皿接种（霉菌形态观察及鉴定用） 倒平板 — 接种（单/三点接）— 接种环灭菌。 1、为什么用稀释法和平板划线法能获得微生物纯种？ 2、霉菌平板接种为什么要使平板倒置？ 3、要求根据实验结果写一篇科技论文，字数在2000字左右。 五、 作 业 题