dna的生物合成(精).pptVIP

引物酶在复制原点附近合成一段RNA引物； DNA聚合酶Ⅲ (原核细胞)在引物的3末端逐个添加脱氧核苷酸。 随着复制叉的推进，亲代DNA双螺旋不断被解开，先导链也不断延伸。? ① 先导链的合成 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 ② 随后链的合成 引物的合成：随后链的每个冈崎片段都需要合成 RNA引物。也是由引物酶催化。? 冈崎片段的合成：DNA聚合酶Ⅲ(原核细胞)在引物的3末端使DNA链延伸，直至抵达其下游的另一个冈崎片段的RNA引物的5端。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 ② 随后链的合成 冈崎片段的连结：DNA聚合酶Ⅰ一面以其DNA聚合活性在上游冈崎片段的3-OH末端添加脱氧核苷酸，一面以其5→3核酸外切活性切除引物，直至将引物全部切除。 DNA连接酶将最后的缺口补好。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 ③ 先导链和随后链中DNA的延伸由同一个DNA聚合酶Ⅲ全 酶二聚体催化 随后链的模板回折成环，从而使冈崎片段的延伸方向与先导链的延伸方向一致，它们的3末端分别落在DNA聚合酶Ⅲ全酶的双活性部位。因此，随着聚合酶的移动，两条链同时延伸。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 3.复制叉的推进-复制叉推进的过程 4.复制的结束 复制的终止没有特殊的信号 原核生物中： 其环状的DNA从单点开始双向复制，当两个复制叉在复制原点的对面处相遇并合并时，结束复制，形成两个环状DNA分子。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 4.复制的结束 复制的终止没有特殊的信号 真核生物中： 其线状的DNA上有多个复制原点，因此形成多个复制眼，复制叉的推进使复制眼增大，直至各个复制眼融合，复制终止，形成两个线状DNA分子。 （五）复制的过程 一.DNA的复制 （五）复制的过程 一.DNA的复制 （六）DNA复制的忠实性 一.DNA的复制 差错率为10-9-10-10 新合成的子链与母链之间碱基配对严格性 使用引物RNA DNA聚合酶对底物专一性 DNA聚合酶的校对作用 5. DNA修复机制 一.DNA的复制 The probable course of events during initiation of E. coli replication 一.DNA的复制 The probable course of events during initiation of E. coli replication 二. DNA的损伤与修复 DNA分子的完整性对细胞至关重要，这一点是其它生物分子无法比拟的。在生物的进化中，DNA复制中可因DNA聚合酶催化作用引发出偶然的错误。环境因素（如辐射、紫外光照射、化学诱变物等）也可引起DNA序列上的错误，这些错误若不能予以改正而保留下来，会直接影响机体的生理功能，以致影响到后代的正常生长和发育。但是，生物体内存在有效的修复（repair）体系，保证了DNA复制的高度精确性。 第一节 DNA的生物合成 一. DNA的复制 复制部位： 真核生物：细胞核 原核生物：细胞质的核质区 (一) 复制的反应 n1d ATP n2d CTP n3d GTP n4d TTP DNA聚合酶 DNA模板 DNA +（n1+n2+n3+n4)PPi PPi随即被焦磷酸酶水解，从而推动聚合反应的进行。 一. DNA的复制 (二) 复制的方式 DNA复制时，亲代DNA的双螺旋先解旋并分开，然后以每条链为模板，按照碱基配对原则，各形成一条互补链。这样，从亲代的一个DNA双螺旋分子复制成两个与亲代的碱基序列完全相同的子代DNA分子。每个子代DNA分子中，有一条链来自亲代DNA，另一条则是新形成的，这样的复制方式叫做半保留复制（semiconservative replication）。 半保留复制 一. DNA的复制 半保留复制 (二) 复制的方式 一. DNA的复制 如何证明半保留复制 (二) 复制的方式 一. DNA的复制 1958年，Meselson 证明：用，15NH4Cl唯一氮源培养大肠杆菌，之后，用14NH4Cl培养，然后进行CsCl2进行密度梯度离心。由于15NH4Cl密度大于14NH4Cl，因此，形成不同区带，经过若干代培养后，两个14NH4Cl区带增多。 (二) 复制的方式 一. DNA的复制 (二) 复制的方式 一.DNA的复制 半保留复制 全保留复制 (三) 复制反应注意点 DNA复制除入DNA聚合酶, DNA模板, dNTP外,还需要多种蛋白质因子、引物、Mg2+