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质粒（plasmid）;载体的功能及特征;载体的功能及特征;2.1.1质粒载体;质粒的基本特征;质粒的基本特征;质粒的基本特征;质粒的基本特征;2.1.1.2质粒的构建;改造的原则;2.1.1.3质粒的分类;重要的大肠杆菌质粒载体;pUC18 / 19： ;重要的大肠杆菌质粒载体;重要的大肠杆菌质粒载体;2.1.1.4质粒DNA的分离纯化;氯化铯密度梯度离心法： ;碱溶法： ;沸水浴法： ;另一类载体 噬菌体或病毒DNA;2.1.3.1l 噬菌体的生物学特性：;l 噬菌体生物学特性： 生物结构;l 噬菌体生物学特性： 感染周期;;l 噬菌体生物学特性： 溶原状态;l-DNA重组分子的体外包装：;2.1.2.2l-DNA载体的构建：缩短长度;;2.1.2.4 l-DNA及其重组分子的分离纯化：P22;l-DNA作为载体的优点：;2.1.3 M13单链噬菌体DNA载体;M13 DNA“+”链进入雄性大肠杆菌→合成“-”链
→产生双链M13 DNA（复制型DNA或RF-DNA）
→按环状双链DNA方式复制，同时以“+”链DNA为模板转录包装蛋白
→RF-DNA达200拷贝时，单链DNA特异结合蛋白与“+”链结合而阻断合成“-”链
→结果只能以“-”链为
模板合成“+”链
→“+”链DNA被包装蛋
白包装成新的M13噬菌体
→挤出受体细胞
→宿主细胞不被溶菌。
;2.1.3.2M13 DNA载体的构建：;M13 DNA载体的特点：; 与动植物受体细胞相适应的载体一般选择相应动植物的病 ;2.1.4质粒与噬菌体杂合载体;2.1.4.1考斯质粒（cosmid）;考斯质粒载体的特点：;2.1.4.2 噬菌粒（phagemid or phasmid）;重要的噬菌粒载体：pUC118 / 119;重要的噬菌粒载体：pBluescript 体外转录载体;2.1.5人造染色体载体;细菌人造染色体（Bacterial Artificial Chromosomes BAC）
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