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一步法鼠基因型鉴定试剂盒.PDF
碧云天生物技术/Beyotime Biotechnology
订货热线:400-168-3301或800-8283301
订货e-mail :order@
技术咨询:info@
碧云天网站 微信公众号 网址:
一步法鼠基因型鉴定试剂盒
产品编号 产品名称 包装
D7284S 一步法鼠基因型鉴定试剂盒 100次
D7284M 一步法鼠基因型鉴定试剂盒 500次
产品简介:
碧云天生产的一步法鼠基因型鉴定试剂盒,即One-step genotyping assay kit for rodents ,是一种特别便捷的使用鼠血样品一
步法直接进行PCR ,从而实现鼠基因型快速鉴定的试剂盒。无须抽提基因组DNA ,血液样品可以直接用于PCR 。并且PCR
结束后可以直接上样电泳,无需添加上样缓冲液。
本试剂盒采用了耐血的HemoTaq™ DNA聚合酶,这是一种经过基因工程改造的非常高效的适用于EDTA 、肝素或柠檬酸钠
抗凝血样品或干血斑样品直接PCR检测的耐热DNA聚合酶,确保了本试剂盒可以快速便捷地用于鼠基因型鉴定。
对于全血样品可以直接PCR检测,无须提取DNA 。本产品对小鼠、大鼠等全血中血红素等各种PCR抑制剂表现出超强的抗
性,对于新鲜采集的、4ºC保存或低温冻存EDTA 、肝素或柠檬酸钠抗凝的人或小鼠血液样品或者干血斑(如whatman903或
FTA采血卡上的干血斑) ,都无需进行DNA提取纯化,可以直接用于PCR扩增目的DNA 。
所需血样少,耐血能力高。本产品用于20μl 的PCR扩增体系时,通常仅加入约1μl抗凝全血即可顺利完成PCR检测。20μl 的
PCR扩增体系中最大加入的血液量可以达到4μl,即20%体积,但通常建议使用1μl血液样品。
兼容EDTA、肝素或柠檬酸钠三种常见抗凝血。血液样品用于PCR检测时,EDTA 、肝素或柠檬酸钠抗凝血都可以兼容的。
如果希望取得最佳的检测效果,优先推荐EDTA抗凝血。因为EDTA可以螯合多种核酸酶发挥酶活性所必须的金属离子,从
而可以更好地抑制核酸的降解。
本试剂盒提供了一对阳性对照引物,便于确认PCR检测效果。该对引物是一种小鼠、大鼠和人的通用引物,可以扩增小
鼠、大鼠或人基因组DNA 中β-actin基因的300bp DNA片段。
本产品的耐血体积百分比可以达到20-50%,但推荐血液用量为5%。本产品用于肝素、柠檬酸钠和EDTA抗凝血PCR检测的
效果参考图1。图中可见,本产品对肝素(heparin)、柠檬酸钠和EDTA处理的全血的耐受体积百分比可以达到50%、20%和
30% 。尽管本产品有很好的耐血效果,实际使用时最优先的推荐血液用量为5% 。实际使用时,可能会因为高血脂等异常血
液,导致血液用量加大,从而会存在PCR效果下降的风险。
图1. 碧云天生产的一步法鼠基因型鉴定试剂盒扩增图中所示不同抗凝剂采集的抗凝全血中目的基因的电泳效果图。使用一
步法鼠基因型鉴定试剂盒及本试剂盒提供的Control primer mix,在PCR体系中直接加入5-50%不同体积百分比的不同抗凝剂
采集的抗凝血,用于扩增β-actin基因的300bp DNA片段后的电泳效果图。M, DNA marker (D0110, DNA Ladder (0.2-12 kb, 12
bands)) 。
本产品中含有的HemoTaq™ DNA Polymerase (Blood-resistant) 的保真性和Taq D
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