大鼠慢性束缚应激后肠道病理及其菌群变化-生物技术进展.pdfVIP

生物技术进展 ２０１７年　 第７卷　 第１期　 ５２~５７ 研究论文 Ｃｕｒｒｅｎｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　 ＩＳＳＮ２０９５￣２３４１ Ａｒｔｉｃｌｅｓ 大鼠慢性束缚应激后肠道病理及其菌群变化 王　 华ꎬ　 王志红∗ 合肥市第二人民医院消化内科ꎬ合肥 ２３００００ － 摘　 要: 基于慢性束缚应激法建立大鼠慢性应激模型ꎬ结合苏木精 伊红染色和肠道细菌基因间重复序列 (ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｉａｌ ｒｅｐｅｔｉｔｉｖｅ ｉｎｔｅｒｇｅｎｉｃ ｃｏｎｓｅｎｓｕｓꎬＥＲＩＣ)￣ＰＣＲ技术观察大鼠肠道组织病理及菌群变化规律ꎮ 选取 １０ 只健康 雄性ｓｐｒａｇｕｅ￣ｄａｗｌｅｙ (ＳＤ)大鼠ꎬ随机分为对照组和模型组ꎬ每组５ 只ꎮ 对照组正常饲养ꎬ模型组采用束缚筒每天束缚应 激４ ｈꎬ连续造模３０ ｄꎬ造模前后记录大鼠的体重并于造模后进行行为学评估ꎬ采用脱臼法处死并收集大鼠肠道组织及其 内容物ꎬ包被切片后进行ＨＥ染色ꎬ肠道内容物初步分离后提取基因组ＤＮＡ并采用ＥＲＩＣ￣ＰＣＲ检测菌群变化规律ꎮ 结果 显示ꎬ与对照组相比ꎬ应激模型组大鼠体重、穿越次数、直立次数、理毛次数均显著降低ꎬ强迫游泳不动时间显著延长、糖 水偏爱显著降低ꎻ造模后大鼠肠道微绒毛结构破损严重ꎬ细胞核轻微固缩且深染ꎬ肠道菌群变化明显ꎬ出现了多个特征性 变化条带ꎮ 采用慢性束缚应激法并结合行为学评估成功建立了大鼠慢性应激模型ꎬ结合病理学检测和肠道菌群表达谱 变化为基于慢性应激相关疾病的研究提供了重要参考ꎬ具有一定的应用价值ꎮ 关键词: 大鼠慢性束缚应激模型ꎻ行为学评估ꎻ肠道组织ꎻ肠道菌群ꎻ变化 ＤＯＩ:１０.３９６９/ｊ.ｉｓｓｎ.２０９５￣２３４１.２０１７.０１.０９ Ａｌｔｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ Ｒａｔ Ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ Ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄ Ｆｌｏｒａ Ｂａｓｅｄ ｏｎ ｔｈｅ Ｃｈｒｏｎｉｃ Ｓｔｒｅｓｓ Ｍｏｄｅｌ ＷＡＮＧ ＨｕａꎬＷＡＮＧＺｈｉｈｏｎｇ∗ Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ ｏｆ Ｇａｓｔｒｏｅｎｔｅｒｏｌｏｇｙꎬｔｈｅ Ｓｅｃｏｎｄ Ｐｅｏｐｌｅｓ Ｈｏｓｐｉｔａｌ ｏｆ ＨｅｆｅｉꎬＨｅｆｅｉ２３００００ꎬＣｈｉｎａ Ａｂｓｔｒａｃｔ:Ｔｏ ｅｓｔａｂｌｉｓｈ ｔｈｅ ｒａｔ ｃｈｒｏｎｉｃ ｓｔｒｅｓｓ ｍｏｄｅｌ ｕｓｉｎｇ ｔｈｅ ｃｈｒｏｎｉｃ ｓｔｒｅｓｓ ｍｅｔｈｏｄꎬａｎｄ ｆｕｒｔｈｅｒ ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｖａｒｉａｔｉｏｎ ｒｕｌｅ ｏｆ ｒａｔ ｉｎｔｅｓｔｉｎａｌ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ａｎｄｉｔｓｆｌｏｒａｂａｓｅｄｏｎＨＥｓｔａｉｎｉｎｇａｎｄＥＲＩＣ￣ＰＣＲｔｅｃｈｎｉｑｕｅ.Ａｔｏｔａｌｏｆ １０ｈｅａｌｔｈｙｍａｌｅＳＤｒａｔｓｗｅｒｅｃｈｏｓｅｎꎬ ａｎｄ ｒａｎｄｏｍｌｙ ｄｉｖｉｄｅｄ ｉｎｔｏｔｗｏｇｒｏｕｐｓ:Ｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐ ａｎｄｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐꎬ５ｒａｔｓｉｎｅａｃｈｇｒｏｕｐ.Ｗｈｅｒｅｉｎꎬｒａｔｓｉｎｃｏｎｔｒｏｌ ｇｒｏｕｐｗｅｒｅ ｒｅｇｕｌａｒ ｒａｉｓｅｄꎬａｎｄ ｒａｔｓ ｉｎ ｍｏｄｅｌ ｇｒｏｕｐ ｗｅｒｅ ｐｅｒｆｏｒｍ ｃｏｎｓｔｒａｉｎｔ ｓｔｒｅｓｓ ｆｏｒ ４ ｈｏｕｒｓ ｅｖｅｒｙｄａｙ ｕｓｉｎｇ ａ ｃｏｎｓｔｒａｉｎｔ ｔｕｂｅ ｆｏｒ ３０ ｄａｙｓꎬ ａｎｄ ｔｈｅ ｒａｔｓ ｂｏｄｙ ｗｅｉｇｈｔ ｗａｓ ｒｅｃｏｒｄｅｄ ｂｅｆｏｒｅ ｏｒ ａｆｔｅｒ ｍｏｄｅｌｉｎｇꎬａｎｄ ｔｈｅｎ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｈｅ ｂｅｈａｖｉｏｒａｌ ｅｖａｌｕａｔｉｏｎ. Ｉｎ ａｄｄｉｔｉｏｎꎬｒａｔｓ ｗｅｒｅ ｋｉｌｌｅｄꎬａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｓｔｉｎａｌｔｉｓｓｕｅｓａｎｄｃｏｎｔｅｎｔｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄꎬａｎｄｔｈｅｎｓｌｉｃｅｄｔｏ