外源基因转水稻的途径遗传行为和表达.pdfVIP

维普资讯 中国私 米 2008年第 1期 外源基因转水稻的途径、遗传行为和表达 颜美仙 黄大年 钱 前 (中国水稻研究所 水稻生物学国家重点试验室 ，浙江杭州310006；通讯作者，E～mail：qianqian188@hotmail．corn) 摘 要：随着分子生物学和转基因技术的快速发展，人类对外源基因在植物体内的遗传和表达有了进一步的认 识。本文着重介绍了水稻转基因技术以及外源基因在水稻中的遗传、表达行为。 关键词：水稻；转基因；遗传行为；遗传表达 水稻是全世界 I／3以上人口赖以生存的重要粮食 试剂诱导处理后，农杆菌介导转化水稻的频率有了新 作物 ，近年来 ，由于稻属种质资源的有限性和常规育种 突破 ，使其成为植物遗传转化的主要途径之一。 方法的局限性，制约了水稻进一步的遗传改良。随着分 尽管仍然存在籼稻转化频率不及粳稻，遗传转化 子生物学研究的深入，基因的分离 、克隆和重组技术以 的受体还要依赖未成熟及愈伤新组织，然而，农杆菌介 及转基因技术的日趋发展和成熟，遗传转化已成为水 导法具有转化频率高，外源频率高，外源基因插入拷贝 稻遗传改良的一种有效手段。 数低，对转化受体不会造成损伤，不需昂贵的仪器设备 水稻作为基因功能研究的模式植物之一，正发挥 等优点。因此，从20世纪90年代后期至今，该法在转 着重要的作用。随着外源基因的水稻遗传转化体不断 基因水稻改良和水稻功能基因组研究方面得到了广泛 建立，使我们对外源基因在遗传转化体内的遗传与表 应用。 达有了更深的认识。本文综述了水稻转基因技术及其 1．3 PEG转化法 外源基因在水稻中的遗传、表达行为的研究。’ PEG转化法是禾谷类作物转化方法中最早应用的 方法之一，主要原理是在化合物聚乙二醇 (PEG)、多 l 水稻转基因的途径 聚一L一鸟氨酸(PLO)、磷酸钙及高pH条件下诱导原生 1．1 基因枪轰击法 质体体外摄取外源DNA。原生质体作为受体具有群体 基因枪法是基因直接转化方法之一，又称粒子轰 数大，便于操作，DNA分子易于进入 ，易获得纯合转化 击技术 、生物发射技术或高速微粒子发射技术。1989 子等优点。然而，由于禾谷类原生质体培养难度大，再 年 Klein[-】等首先用基因枪转化玉米获得转基因植株 ， 生频率低，周期长，易发生基因重排，外源基因在转基 随后在水稻、小麦、高梁 、大麦和燕麦等重要禾谷类作 因后代中表现非孟德尔遗传等，因此不太适合水稻的 物中相继成功，得到普遍应用。基因枪法可有效地将外 转化研究。 t 源基因转移到受体细胞中，而且任何类型的植物细胞、 1．4 电激法 组织都可以作为它的转化对象。此法克服了农杆菌介 电激法也是以原生质体为受体的转化方法，其原 导法的宿主范围受限制和原生质体转化系统的基因型 理是利用短暂的电场脉冲作用，使原生质体膜形成可 依赖性，具有操作简单方便等优点。然而基因枪法转化 逆的瞬问通道，使DNA进入细胞。其转化效率高于 存在成本较高，转化频率相对较低，外源基因整合的拷 PEG法，使用这一技术转化成功的有水稻、玉米、大豆、 贝数多，难以实现DNA大片段的转移等缺点，仍需加 甘蔗、高粱、烟草、小麦等多种植物，但 目前已很少应用