仪器分析第3章2012(2).pptVIP

3 离子色谱法 离子色谱连续抑制装置图（分析阴离子，洗脱液NaOH) 离子色谱的应用 纸层析和薄层层析法(介绍）（制备、电泳不讲) 操作技术 特点及应用 * * 2. 离子对色谱(针对强极性的有机酸、有机碱的分离） 离子对色谱法是将一种（或数种）与溶质离子电荷相反的离子（称为对离子或反离子）加到流动相或固定相中，使其与与溶质离子结合形成离子对，从而控制溶质离子的保留值而对溶质离子进行分离的色谱法。 离子对色谱法其分离原理与离子对萃取原理相似： Baq+ + Paq- （B++P-）aq 离子对的体积大，又无静电荷，所以有显著的疏水性，能优先地溶于极性的有机相中。如果选择合适的反离子，并调节至合适的浓度，就能够将Baq+ 有效地萃取到有机相中。 (Ion Chromatography,简称IC) 以无机、特别是无机阴离子混合物为主要分析对象, 在七十年代出现、八十年代迅速发展。 传统离子交换色谱存在着两个难于解决的问题： 1.需要高浓度淋洗液洗脱且洗脱时间很长； 2.洗脱后的组分缺乏灵敏、快速的再线检测方法。 原理: 采用交换容量非常低的特制离子交换树脂为固定相， 在分离柱后，用另外一支抑制柱来消除淋洗液的高本底电导; 采用电导检测器检测流出组分。快速分离分析微量无机离子混合物; 各种抑制装置及无抑制方法的出现，发展迅速. R-OH(阴离子交换树脂)+NaBr==R-Br+NaOH(交换、洗脱) R-H(阳离子交换树脂)+NaOH ==R-Na+H2O R-H +NaBr==R-Na+HBr（H离子淌度大） 电导值小 阴离子分析: 双柱：薄壳型阴离子交换树脂分离柱(3×250mm), 流动相：0.003mol·L-1 NaHCO3 / 0.0024 mol·L-1 Na2CO3，流量138 mL/hr。 七种阴离子在20分钟内基本上得到完全分离，各组分含量在3～50 ppm， 五. 空间排阻色谱 空间排阻色谱也称凝胶渗透色谱，它是基于试样分 子的尺寸和形状不同来实行分离的。 填充剂是凝胶。它是一种表面惰性，含有许多不同 尺寸的孔穴或立体网状物质。凝胶的孔穴或立体网孔的 大小与被分离的试样分子的大小相当。 太大的分子由于不能进入孔穴而被排斥，先随流动相流 出。 小分子则完全相反，它能进入孔穴而完全不受排斥， 所以最后流出。 中等大小的物质分子则可以渗到较大的空隙中，但受到 较小空隙的排斥，所以介于两者之间。 凝胶是一种多孔性的高分子聚合体，表面布满孔隙，能被流动相浸润，吸附性很小。 凝胶色谱法的分离机制是根据分子的体积大小和形状不同而达到分离目的。 凝胶色谱法的作用机制 ★体积大于凝胶孔隙的分子，由于不能进入孔隙而被排阻，直接从表面流过，先流出色谱柱； ★小分子可以渗入大大小小的凝胶孔隙中而完全不受排阻，然后又从孔隙中出来随载液流动，后流出色谱柱； ★中等体积的分子可以渗入较大的孔隙中，但受到较小孔隙的排阻，介乎上述两种情况之间。 凝胶色谱法是一种按分子尺寸大小的顺序进行分离的一种色谱分析方法。 凝胶色谱法的固定相 软质凝胶、半硬质凝胶和硬质凝胶三种。 凝胶色谱法的应用特点 ★保留时间是分子尺寸的函数，适宜于分离相对分子 质量大的化合物，相对分子质量在400～8×105的任 何类型的化合物 ★保留时间短，色谱峰窄，容易检测 ★固定相与溶质分子间的作用力极弱，趁于零，柱的 寿命长 ★不能分辨分子大小相近的化合物，分子量相差需在 10%以上时才能得到分离 化学键合固定相一般利用硅胶为基体，利用硅胶表面的硅醇基与有机分子之间成键，即可得到各种极性的固定相。 键合上去的有机基团主要有三类： 疏水基团 极性基团 离子交换基团 §3.4 化学键和固定相 键合的途径主要有： 用醇或胺与硅醇基反应 -Si-OH + ROH---- -Si-OR + H2O 用有机氯硅烷与硅醇基反应 -Si-OH + R3SiCl---- -Si-OSiR3 + HCl 通过氯化硅胶与有机锂或格式试剂反应 -Si-OH + SOCl2---- -Si-Cl -Si-Cl + Rli或RMgCl-----Si-R （一）反相键合相色谱法 固定相 极性小 -C18H37 -C6H5