固相萃取技术.pptxVIP

固相萃取技术 ; 一、固相萃取概述 二、固相萃取原理 三、固相萃取的简要过程 四、固相萃取装置 五、固相萃取分类 六、固相萃取方法的建立 七、SPE的应用 八、固相萃取应用新进展 九、SPE的展望 ; 所谓萃取法 ,就是从样品中提取组分 ,传统的方法是液-液萃取法 ( LLE) ,即用液体作为提取剂。 固相萃取（Solid Phase Extraction, SPE） 是19世纪70年代后期发展起来的样品前处理技术。它发展迅速，广泛应用于环境、制药、临床医学、食品等领域。 固相萃取（Solid Phase Extraction，SPE）也称固相提取、液-固萃取。是一项结合了选择性保留、选择性洗脱等过程的分离技术。主要用于样品的分离、纯化和浓缩，与传统的液液萃取法相比较可以提高分析物的回收率，更有效的将分析物与干扰组分分离，减少样品预处理过程，操作简单、省时、省力。 ;①回收率和富集倍数高 ②有机溶剂消耗量低，可减少对环境的污染 ③采用高效、高选择性的吸附剂，能更有效的将分析物与干扰组分分离 ④无相分离操作过程，容易收集分析物 ⑤能处理小体积试样 ⑥操作简便、快速，费用低，易于实现自动化及与其他分析仪器连用。 ;固相萃取的基本原理是样品在两相之间的分配，即在固相（吸附剂）和液相（溶剂）之间的分配。 固相萃取保留或洗脱的机制取决于被分析物与吸附剂表面的活性基团，以及被分析物与液相之间的分子作用力。 洗脱模式有两种：一种是目标化合物比干扰物与吸附剂之间的亲和力更强，因而被保留，洗脱时采用对目标化合物亲和力更强的溶剂；另一种是干扰物比目标化合物与吸附剂之间的亲和力更强，则目标化合物被直接的洗脱。通常采用前一种洗脱方式。;反相固相萃取 正相固相萃取 离子交换萃取 免疫亲和 ; 一个完整的固相萃取步骤包括固相萃取柱的预处理、上样、洗去干扰物质、洗脱及收集分析物四个步骤。 ;一是为了润湿和活化固相萃取填料，二是为了除去填料中可能存在的杂质，减少污染。 采取的方法是用一定量溶剂冲洗萃取柱。 反相类型的固相萃取硅胶和非极性吸附剂介质，通常用水溶性有机溶剂如甲醇预处理，然后用水或缓冲溶液替换滞留在柱中的甲醇。 正相类型的固相萃取硅胶和极性吸附剂介质，通常用样品所在的有机溶剂来预处理。 离子交换填料一般用3～5mL 去离子水或低浓度的离子缓冲溶液来预处理。 固相萃取填料从预处理到样品加人都应保持湿润，如果在样品加人之前，萃取柱中的填料干了，需要重复预处理过程。 ;b.上样;目的是为了除去吸附在固相萃取柱上的少量基体干扰组分。 一般选择中等强度的混合溶剂，尽可能除去基体中的干扰组分，又不会导致目标萃取物流失。 反相萃取体系常选用一定比例组成的有机溶剂-水混合液，有机溶剂比例应大于样品溶液而小于洗脱剂溶液。 ;市场上可以买到各种类型 SPE产品。最普通使用的形式是 SPE柱 ，此外还有SPE盘和固相微量萃取的形式。 ;1、常见的SPE柱;常见的注射器式萃取柱由三部分组成： A 柱管； B 筛板（烧结垫）； C 固相吸附剂。 ;2、SPE盘;还有一种常见的形式是96孔板，即将小体积固相萃取柱与具有96孔的萃取架相连，再通过自动化系统进行控制。 这种装置的柱床很薄，与样品接触面积大，可耐受很高的流速，因此能在较短的时间内完成大批量样品的制备 ;一、SPE根据其相似相溶机理可分为三种 1）.反相SPE 吸附剂和目标化合物通常是非极性的或极性较弱的，主要是靠非极性－非极性相互作用，是范德华力或色散力。 2）.正相SPE 吸附剂都是极性的．取决于目标化合物的极性官能团与吸附剂表面的极性官能团之间相互作用，其中包括了氢键，π—π键相互作用，偶极－偶极相互作用和偶极－诱导偶极相互作用以及其他的极性－极性作用。 3）.离子交换SPE 离子交换固相萃取是靠目标化合物与吸附剂之间的相互作用的静电吸引力 。 ;固相萃取吸附剂的选择 固相萃取溶剂的选择 固相萃取的应用 ;固相萃取吸附剂最好为多孔的、具有大的表面积的固体颗粒。 固相萃取吸附剂应有较低的空白值。 萃取吸附过程必须可逆且有高的回收率。 固相萃取吸附剂要有高的化学稳定性。 固相萃取吸附剂必须与样品溶液有好的界面接触;键和硅胶吸附剂 石墨碳 离子交换树脂 金属配合物吸附剂 聚合物吸附剂 免疫亲和吸附剂 分子嵌入聚合物 ;; 试样基质和分析物的性质， 如： 结构、 极性、 溶解度和酸碱性质等； 试样中分析物的浓度或浓度范围； 试样溶剂的性质， 试样中存在哪些 对所选 分析方法有干扰的物质； 用什么方法进行试样分析， 该方法对试样有什么要求； 试样预处理所要达到的目的。 ;SPE吸附剂的选择举例;如果洗脱液选得合适，样品的净