试剂盒提供的试剂.doc

PAGE 产品信息和操作指南 Human G-CSF预包被 ELISA kit Cat# : DKW12-1731-048 / DKW12-1731-096 本试剂盒专用于科研，而非用于诊断 Human Human G-CSF DKW12-1731 目 录 产品简介…………………………………………………………… 1 知识背景…………………………………………………………… 1 试剂盒提供的试剂………………………………………………… 2 需要实验者自行准备的试剂与仪器……………………………… 2 注意事项…………………………………………………………… 3 试剂的配制………………………………………………………… 5 操作过程…………………………………………………………… 7 结果分析…………………………………………………………… 9 试剂盒的保存……………………………………………………… 9 操作步骤一览表…………………………………………………… 10 参考文献…………………………………………………………… 11 ELISA测定中可能会出现的问题及解决方法……………………12 预包被ELISA 试剂盒系列产品………………………………… 15 1 - 产品简介： Quick EIATM人G-CSF ELISA试剂盒是通过酶联免疫吸附技术，体外定量检测人血清、血浆、缓冲液或细胞培养液中的G-CSF，可同时检测天然的和重组的G-CSF。本试剂盒为预包被板，整个过程孵育时间不超过4hr，洗涤12次。本试剂盒专用于科研，而非用于诊断。 使用前请仔细阅读说明书并检查试剂盒组分，若有任何疑问请与达科为生物技术有限公司联系，E-mail：RD@. 检测范围：8000-125pg/ml 灵敏度：30pg/ml 重复性：板内、板间变异系数均＜10％。 知识背景： 粒细胞集落刺激因子（G-CSF）是一种多效性细胞因子，对增殖、分化和中性粒细胞谱系中造血干细胞的激活有特异性的作用。它可以由单核/巨噬细胞、成纤维细胞、内皮细胞、星形胶质细胞、成骨细胞、骨髓基质干细胞及许多癌细胞产生。研究表明对感染和炎症介质IL-1β, TNFα和 LPS.的反应，G-CSF产物会上调。IL-17被证实可以调控G-CSF的产物。临床上，G-CSF可以用于改良化疗引起的白细胞减少和骨髓移植后严重慢性粒细胞减少（1-6）。 2 - 试剂盒提供的试剂： 试剂 规格 配制 Cytokine standard 2/1瓶* 干粉状，按瓶上说明操作 Biotinylated antibody 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释 Streptavidin-HRP 2/1瓶* 1：100用Dilution buffer R（1×）稀释 Dilution buffer R（1×） 3/2瓶* 即用型 Washing buffer（50×） 1瓶 1∶50 用蒸馏水稀释 TMB 1瓶 即用型 Stop solution 1瓶 即用型 Precoated ELISA plate 8×12或8×6* 即用型 封板膜 2/1张* 即用型 说明书 1份 *：96/48 Tests 需要实验者自行准备的试剂与仪器： 酶标仪（建议参考仪器使用说明提前预热） 微量加液器及吸头：P10，P50，P100，P200，P1000 蒸馏水或去离子水 全新滤纸 旋涡振荡器和磁力搅拌器 3 - 注意事项： 试剂应按瓶上标签说明储存，使用前室温平衡20-30min。实验前室温平衡对Washing buffer（50×）、Dilution buffer R（1×）、Precoated ELISA plate和TMB有重要意义。 冻干标准品冰上操作，按照标签说明溶解干粉，充分混匀，按照一次使用量分装，-20℃贮存，避免反复冻融 预包被板条使用前，请恢复到室温后再打开外包装袋，实验中不用的板条立即放回包装中，密闭封口，4℃可保存1个月 Washing buffer（50×）在4℃保存可能有结晶析出，使用前务必使结晶完全溶解后（如加热、平衡温度后混匀等）再配置成Washing buffer（1× HRP和检测抗体体积量很小，使用前请高速短暂离心管子，以使管壁或瓶盖的液体沉积到管底。 实验操作中请使用一次性的吸头，避免交叉污染。 使用前检查试剂盒内各种试剂；试剂稀释、加样和中止反应充分混匀或者摇匀对实验结果尤为重要，最好使用低速频率振荡器或者反应过程中每15分钟手工摇匀一次。 实验板孔加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应孔的孵育时间一致。 使用洁净的塑料容器盛装洗涤液。 洗涤过程中反应孔中残留的洗涤液应在滤纸上充分拍干，滤纸上看不到水印。勿将滤纸直接放入反应孔中吸水。