2015-9-28-第三章—蛋白质研究技术-1 (1).ppt

提纲 一、蛋白质的理化性质（略讲） 二、蛋白质的研究技术 三、蛋白质的分类（不讲） 盐 析 盐析的定义：许多生物物质如蛋白质、多肽、多糖、核酸、病毒等都可以在溶液中加入中性盐而沉淀析出，这一过程称为“盐析”。 盐析的原理 蛋白质在稀盐溶液中的溶解度是随着盐浓度的增加而增加的，主要是中性盐离子对蛋白质复杂表面极性基团及水活度的影响，增加了蛋白质分子与溶剂分子相互作用力，使蛋白质的溶解度增大。但中性盐的浓度增加到一定程度时，水分子在中性盐的作用下活度大大降低，蛋白质表面电荷大量被中和，最后破坏了蛋白质外表的水化膜，同时这些离子所带的电荷，也能削弱蛋白质分子所带的电荷，即无机盐可消除稳定蛋白质胶体稳定存在的两个因素，而使蛋白质分子之间相互聚集而沉淀。 盐析法的优缺点 成本低，不需要特别昂贵的仪器设备。 操作简单，安全。 对许多生物活性物质具有稳定作用。 对溶液中分离物的总浓度要求（2mg/ml）。 由于发生共沉淀现象，故分辨率不高。 （一）盐分级沉淀 盐的选择 硫酸铵是分级沉淀蛋白质的一种极有用的盐，具有以下优点： 溶解度大，对温度不敏感，故在温差较大时，其溶解度改变较小。 分级效果好，利于除去大量的杂蛋白。 稳定性好，在高盐低温时对蛋白质的结构有稳定作用。 价格低廉