试剂标准操作规程sopamy.docVIP

文件号：AA 第1版 页数 PAGE 1 共 NUMPAGES 5 页 威特曼生物科技（南京）有限公司 试剂标准操作规程 项 目 淀粉酶（AMY） 方 法 GalG2CNP速率法 编写人 日期 审核人 日期 批准人 日期 文件分发部门和/或个人 本规程自2006年8月01日起实施，每1年复审一次 医务科保管者 院长办公室保管者 院档案室保管者 检验科主任 临床化学检验室 目 录 检测原理 标本采集与处理 2.1 受检者的准备 2.2 静脉采血 2.3 抗凝剂 2.4 标本处理 3. 试剂 3.1 试剂 3.2 校准血清 3.3 试剂、校准血清的稳定性 4. 仪器 5. 操作 6. 计算 7. 操作性能 7.1 精密度 7.2 准确度 7.3 灵敏度 7.4 可报告范围 7.5 特异性 7.6 干扰 8. 参考值 9. 临床意义 附录A: 参数 1. 检测原理 α-淀粉酶催化GalG2CNP生成CNP。CNP在405nm处有特异吸收峰，其生成的速率与血清中α-AMY的活性成正比。在405nm处测定CNP的生成速率，即可测出α-AMY活性。 α-AMY GalG2CNP + H2O GalG2 + CNP 2．标本采集与处理 2.1 受检者的准备： 病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。 2.2 静脉采血： 除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。 2.3 抗凝剂： 血浆使用肝素或EDTANa2（1mg/mL）作为抗凝剂。 2.4 标本处理： 血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，置洁净试管加盖低温保存。 3．试剂 3.1 试剂： 威特曼生物科技（南京）有限公司AMY试剂盒，为液体双试剂，各组分如下： 组 成 浓 度 MES-缓冲液 PH=6.0 100mmol/L 氯化钙 50mmol/L 氯化镁 10mmol/L 曲通X-100 0.1% 叠氮钠 0.09% GalG2CNP 3mmol/L 3.2：校准血清 使用威特曼生物科技（南京）有限公司提供的校准血清或采用因数法。按照说明书提供的样本和试剂比例，理论因数=13792。 校准频次： 空白定标：每日需做试剂空白定标。 全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的±2SD范围，需要全点定标。 3.3 试剂、校准血清的稳定性： 原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。 18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。当试剂空白吸光度高于0.7时，试剂按照失效处理。 多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。 4．仪器 YY型号仪器。 5．操作 样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为速率法，参数见后附附录A。 试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。 6．计算 ΔA/min×Vt×1000 AMY(U/L) = = ΔA/min×F e×Vs×d 式中：ΔA/min—— 每分钟吸光度变化率； e —— 18.5 摩尔吸光系数； Vt—— 反应液总体积（ml）； d —— 1 比色杯光径（cm）； 1000—— 变化因数； Vs—— 标本体积（ml）； 7．操作性能 7.1 精密度： 批内CV1.25%，批间CV3.11%。 7.2 准确度： 测量结果在质控血清靶值±2SD范围内。不同方法学试剂的质控结果之间差异较大，使用时请确保质控选择与试剂的方法学保持一致。 7.3 灵敏度： 淀粉酶浓度为：158U/L时，吸光度变化率ΔA405nm/min为0.605～0.0690。 7.4 可报告范围： 血清与试剂用量之比为2：100：25时，测定上限为1800U/L。 7.5 特异性： 测量值在给定值的90%-110％范围内。 7.6 干扰： 内源性干扰物溶血为1000mg/ml、脂血2000mg/ml、黄疸30mg/ml、抗坏血酸300mg/ml对测试结果无明显影响。 8．参考值 0～38U/L 9．临床意义 淀粉酶能分解多糖，如