猴头菌药理作用课件.pptVIP

采用水提醇沉法提取猴头菌多糖，其得率为 6.02%。 样品提取 将 70 只小鼠随机分为 6 组，设正常组、模型组、阳性对照组、猴头菌多糖低、中高剂量组，正常组 10 只，其余各组均为 12 只。无菌条件下抽取传代 7d、生长良好的 H22 荷瘤小鼠腹水，用生理盐水稀释，调整细胞浓度为 5 × 105 个 /mL。在小鼠的右前肢腋部皮下接种 0.2mL/ 只(除正常组外)。接种后第 2 天开始，连续10d ，每日 1 次灌胃，猴头菌多糖组剂量分别为 5 0 、100、200mg/kg(以体质量计)；阳性对照组以 20mg/kg 剂量隔日腹腔注射环磷酰胺；正常组和模型组灌胃等容积生理盐水溶液。 实验分组及模型制备 实验流程 末次给药后次日处死，称取小鼠体质量，摘眼球取血，脱椎处死小鼠。每只小鼠取血20μL，加入380μL 的白细胞计数液，混匀，计白细胞数。取瘤块称质量，按式计算抑瘤率。 m1 为模型组平均瘤质量；m2 为猴头菌多糖 组平均瘤质量。 抑瘤实验 剖取胸腺和脾脏，计算脏器指数。 免疫器官脏器指数分析 实验流程 由表 1 可知，猴头菌多糖高、中、低剂量组与模型组比较，均能显著抑制肿瘤的生长，其中低剂量组的抑制率为 39.13%，达到阳性对照组水平。猴头菌多糖中、低剂量组不同程度地增加动物体质量。阳性对照组明显抑制肿瘤的生长，但同时伴有动物体质量的明 显降低。 实验结果 由表 2 可知，与模型组相比，阳性对照组白细胞数明显下降(P ＜ 0.01)；而猴头菌多糖高、中、低剂量组白细胞数显著高于阳性对照组。造模后各组胸腺指数明显降低，其中阳性对照组最明显；各剂量组胸腺指数显著高于阳性对照组。 实验结果 实验结果 本实验结果显示猴头菌多糖可以有效抑制移植性实体瘤的生长，低剂量组抑制率可达到 39.13%，达到了阳性对照组的水平。但阳性对照组小鼠出现精神萎靡1、体质量减轻、白细胞数和胸腺指数下降等明显的副反应，而各剂量组小鼠无类似的现象。小鼠用药后体质量普遍增加、对白细胞和胸腺的影响不明显，高、中剂量组显著提高血清白蛋白水平。并对血清TNF-α和IL-2含量的测定显示，猴头菌多糖使 TNF-α含量普遍升高，低剂量组 IL-2 含量同时升高，有文献认为中草药的抗肿瘤活性与其能诱生 TNF-α、IL-2 等作用有关，这与本实验结果相符。由此可初步认为猴头菌多糖通过提高机体免疫功能而发挥其抗肿瘤作用。 * * * * 猴头菌 简 介 猴头菌(Hericium erinaceus)隶属于担子菌门、猴头菌科,是著名的药食兼用菌。 子实体和发酵菌丝体均可入药, 性平味甘, 具有助消化、利五脏的功能, 营养丰富, 素有“ 山珍猴头, 海味燕窝” 之说。 猴头菌为木腐真菌，具有很强的降解木质纤维素的能力 猴头菌提取物主要活性成分及作用 多糖——最重要，治疗慢性胃炎胃溃疡, 增强机体 免疫力, 促 进神经生长因子，抗癌 低聚糖——能够较明显改善动物胃黏膜病变, 并可抑制 胃固有腺体减少, 对慢性萎缩性胃炎具有疗效 甾醇类——尤其是麦角甾醇具有抗炎、抗癌等生物活性 猴头菌素 腺苷——有广泛的生物活性, 包括镇静、扩血管、抗缺氧及较弱的抗炎、降胆固醇等作用 漆酶——对人类免疫缺陷病毒-1(HIV-1)逆转录酶有抑制作用, 对艾滋病有一定治疗作用 对消化系统的保护提高免疫功能 抗肿瘤 降血糖 抗氧化延缓衰老 神经保护作用 参考文献：Immunomodulatory effects of Hericium erinaceus derived polysaccharides are mediated by intestinal immunology 01 对消化系统的保护提高免疫功能 豚鼠、羊的血红细胞、PPMI1640中间体 、PMSF：苯甲基硫酰氯 、MTT：噻唑蓝 、荧光微球 、老鼠免疫试剂盒、 t ERK, p-ERK, JNK, p-JNK, p38, p-p38, AKT and p-AKT 抗体、肌动蛋白抗体、western blotting （蛋白免疫印迹）捡毒箱、LDH-乳酸盐脱氢酶溶液、其他试剂（均为分析级以上试剂） 准备材料 4kg新鲜猴头菌子实体+40L蒸馏水 100℃加热4小时→四层纱布过滤→剩余固体用相同方法萃取2次 将2次的滤液混在一起→离心 滤掉滤液中残余的固体 →将滤液浓缩至600ml →在沉淀物中加入4倍体积95%的乙醇（溶剂交换）→100%乙醇（干燥）→乙醚→得到HEP（猴头菌多糖）溶液 HEP制备 实验流程 酚硫酸法测定碳水化合物 布拉德福化验 I2-KI淀粉 高效液相测定——单糖化合物 多糖样品测定 化学性质分析 实验流程 4 HEP注射（小鼠） 6 红细胞凝集实验 巨噬细胞的吞噬能力检测 8 小