酸菜发酵液多糖的分离纯化及结构分析-食品与发酵工业.pdfVIP

1—1802／ts．201604023 DOI：10．13995／j．cnki．1 酸菜发酵液多糖的分离纯化及结构分析 荣向华1，张璇1，赵春燕1’2+ 1(沈阳农业大学食品学院，辽宁沈阳，110161)2(沈阳工学院，辽宁抚顺，113122) 摘 要 以醇沉法提取的酸菜发酵液粗多糖为原料，研究了酸菜发酵液多糖的分离纯化工艺，并对其结构及单 糖组成进行了初步鉴定。比较了Sevag法、TCA一正丁醇法、TCA与木瓜蛋白酶结合法及Sevag与木瓜蛋白酶结 光谱(infrared spectroscopy，IR)和高效液相色谱(highperformanceliguid 构及单糖组成。试验结果表明，TCA与木瓜蛋白酶结合法是较佳脱蛋白方法，蛋白质的清除率为94．86％，多糖 的损失率为19．77％；IR检测结果显示，SJPl／一1具有多糖特征结构；HPLC分析结果表明，SJPII一1主要由果糖、 甘露糖、鼠李糖、葡萄糖4种单糖组成。 关键词 酸菜发酵液；多糖；纯化；结构；单糖 酸菜发酵液是乳酸菌发酵酸菜过程中产生的剩 1．2菌种 余液，除含有乳酸菌、无机盐外，还含有多糖和蛋白质 Lactobacillus1047，沈阳农业大学食品 plantarum 等营养物质¨。。。随着酸菜产业的蓬勃发展，产生了 学院微生物实验室保存。 大量的酸菜剩余液并以废液的形式排放到河流，导致 1．3试剂 水体富营养化，造成环境污染。因此，研究酸菜发酵 无水乙醇、氯化钠、苯酚、硫酸、无水乙醚、丙酮、 液的综合利用具有十分重要的意义。乳酸菌在发酵 葡萄糖、三氯甲烷、三氯乙酸、正丁醇、考马斯亮蓝、1- 过程中除产生对菌体自身有益的荚膜多糖和胞壁多 糖之外，还产生一种扩散到发酵液中的可溶性多糖。 (标准品)、乙腈(色谱级)、甲醇(色谱级)，沈阳化工 乳酸菌胞外多糖除了其对细菌自身的生物学意义之 试剂公司；牛血清白蛋白，国药试剂公司；木瓜蛋白酶 000 外，更重要的是它具有安全无毒、理化性质独特、用途 (酶活力10 广泛、易与菌体分离及可通过深层发酵实现工业化生 50，鼎国试剂公司。 产等优良性质而备受关注。研究表明，乳酸菌发酵酸 1．4 仪器 cm×40 em×50 奶过程中产生的胞外多糖具有很强的生物活性，能够 玻璃层析柱(2．6 em和1．6 cm)， 增强机体免疫力，并具有抗癌、抗肿瘤的功能¨1。基 国药试剂公司；722可见光分光光度计，上海菁华科 于以上观点，同为乳酸菌发酵产物，酸菜发酵液多糖 技仪器公司；RE．52旋转蒸发仪，上海亚荣生化仪器 的结构和功能越来越引起人们的关注。因此，本文利 有限公司；HL．2D恒流泵，上海青浦沪西仪器公司； 用乳酸菌发酵东北酸菜，对酸菜发酵液中多糖的分离 纯化及结构进行初步研究，为进一步研究酸菜发酵液 多糖的活性及开发利用提供理论依据。 色谱仪，美国Waters公司。 1 材料与仪器 2 实验方法 1．1原料与试剂 2．1酸菜发酵液多糖的提取 原料：大白菜，辽宁阜新白菜生产基地。 min离 取过滤后酸菜发酵液，经4000r／min，30