荧光标记及其在高效液相色谱中的应用进展.docVIP

下载本文档

10
0
约9.76万字
约 87页
2019-09-23 发布于湖北
举报
版权申诉

荧光标记及其在高效液相色谱中的应用进展.doc

1、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

曲阜师范大学硕士学位论文 PAGE PAGE 51 TOC \o 1-5 \h \z \u 第一章荧光标记及其在高效液相色谱中的应用进展 1 1. 前言 1 2. 国内外研究现状 6 2.1. 高效液相色谱(HPLC) 6 2.1.1. 高效液相色谱的发展 6 2.1.2. 质谱（MS）及液相色谱－质谱连用（HPLC－MS）的发展和应用 7 2.2. 荧光 8 2.2.1. 荧光现象 8 2.2.2. 荧光原理 8 2.2.3. 影响荧光强度的因素 9 2.2.4. 荧光量子效率 11 2.3. 化学衍生法及其分类 11 2.3.1. 化学衍生法 11 2.3.2. 化学衍生法分类 11 2.3.2.1. 柱前衍生化 11 2.3.2.2. 柱后衍生化 12 2.3.3. 荧光标记 12 2.4. 荧光标记在高效液相色谱中的应用 13 2.4.1. 对羧酸类化合物的标记 13 2.4.1.1. 溴代香豆素类 13 2.4.1.2. 重氮甲烷类 14 2.4.1.3. 联胺类 14 2.4.1.4. 胺类 14 2.4.1.5. 醇类 15 2.4.1.6. 磺酸酯类 15 2.4.2. 对氨基类化合物的标记 15 2.4.2.1. 5-二甲氨基萘-1-磺酰氯(DNS-Cl) 15 2.4.2.2. 4-氟-7-硝基-2,1,3-苯并恶唑(NBD-Cl) 17 2.4.2.3. 9-吖啶基异硫氰酸酯（PITC） 17 2.4.2.4. 荧光胺 17 2.4.2.5. 邻苯二甲醛(OPA) 18 2.4.2.6. 9-芴甲基氯甲酸酯(FMOC) 18 2.4.2.7. 6-氨基喹啉基-N-琥珀酰亚胺碳酸酯(AQC) 19 3. 选题思想和主要研究内容 20 第二章荧光标记试剂的设计合成与表征 22 1. 引言 22 2. 苯并吖啶酮类荧光标记试剂的合成及表征 22 2.1. 合成反应概况图 22 2.3. 仪器 23 2.4. 苯并吖啶酮-9-乙基对甲苯磺酸酯的合成 23 2.4.1. 3-氨基-2-萘甲酸的合成 23 2.4.2. 3-N-苯基-2-萘甲酸的合成 23 2.4.3. 苯并吖啶酮的合成 24 2.4.4. 苯并吖啶酮-9-乙醇的合成 24 2.4.5. 苯并吖啶酮-9-乙基对甲苯磺酸酯的合成 24 2.5. 苯并吖啶酮-9-乙酸的合成 24 3. 咪唑类荧光标记试剂的合成及表征 25 3.1. 合成反应概况图 25 3.2. 试剂 25 3.3. 仪器 25 3.4. 2-(2-(1-芘基)-苯并咪唑)-乙基-对甲苯磺酸酯(PBITS)的合成 25 3.4.1. 2-(1-芘基)苯并咪唑的合成 26 3.4.2. 合成2-(2-(1-芘基)苯并咪唑)-乙醇 26 3.4.3. 合成2-(2-(1-芘基)-苯并咪唑)-乙基-对甲苯磺酸酯 26 4. 小结 26 第三章两种荧光标记试剂BAETS和PBITS用于脂肪酸的高效液相色谱-质谱分析 27 第一节绿色荧光分子苯并吖啶酮-5-乙基对甲苯磺酸酯（BAETS）用于脂肪酸标记及质谱鉴定 28 1. 实验部分 28 1.1. 仪器与试剂 28 1.2. 实验方法 28 1.2.1. 标准溶液的配制 28 1.2.2. 标准品的衍生过程 28 1.2.3. 色谱与质谱条件 28 1.2.4. 椿树木耳中游离脂肪酸的提取 29 2. 结果与讨论 29 2.1. BAETS 光谱性质 29 2.1.1. 紫外光谱 29 2.1.2. 荧光光谱 29 2.1.3. 质谱 30 2.2. 质谱增敏机理 30 2.3. 衍生条件的优化 32 2.4. 标准品的色谱分离及质谱鉴定 33 2.5. 线性回归方程、检出限及重现性 37 3. 实际样品测定 38 4. 小结 39 第二节 2-(2-(1-芘基)-苯并咪唑)-乙基-对甲苯磺酸酯(PBITS)用于狼毒根中游离脂肪酸荧光标记及质谱鉴定 40 1. 实验部