微生态制剂的质量鉴别与选择.docVIP

微生态制剂的质量鉴别与选择、检测指标和标准 张日俊 （中国农业大学饲料生物技术实验室，动物营养学国家重点实验室，北京海淀，100193） 微生态制剂（农业部官方称为“微生物饲料添加剂”）在20世纪70年代兴起时，被认为只有活的微生物才能起到微生态的平衡作用，因此认定微生态制剂是活菌制剂，甚至有一段时间，把微生态制剂就称为“活菌制剂”。但随着科学研究的不断深入，大量资料证明，死菌体、菌体成分、代谢产物也具有调整微生态失调的功效。因此，在1994年德国海德堡召开的国际微生态学术讨论会上，修改了微生态制剂（益生菌）定义：“益生菌是含活菌和（或）死菌，包括其组分和产物的活菌制品，经口或经由其它粘膜途径投入，旨在改善黏膜表面处微生物或酶的平衡，或者刺激特异性或非特异性免疫机制”。人们对活菌的作用比较容易理解，而对死菌的作用了解甚少，有资料证明，从电镜也能直接观察到死菌体也可黏附在肠壁，排斥有害菌，从而调节微生态平衡；菌体的细胞壁成分——脂磷壁酸（LTA）及胞壁肽聚糖（PG），二者都能抑制腐败菌的致癌作用，并有很强的免疫激活作用。死菌体的特点是质量较稳定，比活菌更安全，并可以与抗生素同时使用。代谢产物是指细菌在生命活动过程中产生的代谢产物（排泄物），如酸性物质及细菌素对有害菌有拮抗、杀灭作用，细菌分解食物后的氨基酸以及合成的维生素、酶具有营养作用，菌体碎片对动物体也有免疫促进作用。代谢产物的特点是对动物体的作用较快。 按照最新的益生菌概念内涵来理解，则给微生态制剂的质量评定增加了不少困难。即从成分上至少包括三个方面：活菌数量、死菌体含量、代射产物的种类及含量。FAO/WHO对益生菌也作了定义：益生菌是活的微生物，当摄入足够数量时，对宿主起有益健康作用。大家公认的观点是：益生菌首先在销售过程中要保持活性（存活），而且在动物饲用后还要抵抗胃液胆汁的强酸性消化作用。在国标《微生物饲料添加剂技术通则（NY/T144-2007）》（以下简称《通则》）中指出，微生物饲料添加剂是指在饲料中添加或直接饲喂给动物的微生物或微生物及其培养物，参与肠内微生态平衡或者刺激特异性或非特异性免疫功能、具有促进动物生长和提高饲料转化效率的微生物制剂。在此处的定义中，显然忽略了“死菌”成分和“改善肠道酶的平衡”的功能。作为官方规定，以“严格”为好，由于死菌会给质量评定带来许多困难。由于除《微生物饲料添加剂技术通则》外，微生物饲料添加剂还没有统一的标准，因此，目前还要根据执法部门——农业部的《微生物饲料添加剂技术通则》来进行质量评定。 1微生态制剂产品最常见的质量问题有哪些，如何快速鉴别 1.1微生态制剂最常见的质量问题 1.1.1菌种成分标示不明、扩大功能、使用技术不明确 有些微生态制剂不标明菌种和主要成分，难以进行质量监督和检验；还有些企业任意扩大微生态制剂的作用和用途，用法与用量含糊不清或千篇一律，导致目前市场上微生态制剂产品参差不齐，用法与用量等技术内容不完善，难以确保使用的有效性。 1.1.2活菌量标示值与实际值不相符、甚至活菌很少 微生态制剂中的活菌数是阐明其质量的重要指标之一。活菌制剂在饲料加工、运输、贮存过程中容易失去活性。一些厂家的微生态产品的标示值与实际含量不符，通常表现为标示值远大于保证值，即微生态制剂中能添加到饲料的中有效活菌数（指每克成品当中所含有的有效活菌数量）。在国外产品也有类似的问题，如南非的Elliot和Teversham（2004）评价了9个从美国和欧洲进口的益生素产品，结果发现仅有5/9产品的标示值与实测值相符，3/9的产品标示的菌种与实际相符。 1.1.3杂菌污染 生产微生态制剂的最佳工艺是液体发酵，但一些企业由于缺乏液态发酵和后加工设备以及技术人员而采用投资少、工艺简单的固体发酵法来生产微生态制剂，此法生产的产品有效微生物的含量低，易受杂菌污染，质量难以控制。这是目前大部分微生态制剂生产厂家所采用的方法，也是目前影响微生态制剂推广应用的主要因素，也直接导致低价竞争，不利于微生态制剂产业的可持续发展。 1.1.4效果稳定性 菌种的遗传性（优良性）和保藏、生产工艺、储存时间和条件、使用方法都会影响到产品应用效果的稳定性。一般来说，只有优秀的菌种，配合科学稳定的生产工艺参数才能生产出优质、稳定的微生态制剂。 1.2微生态制剂质量的快速鉴别 关于微生态制剂质量的鉴别方法，一般采用微生物学检验和显微镜检测（镜检法）来检测功能微生物活菌含量和杂菌含量，前者主要通过平板培养计数法。虽然有一些快速测定微生物总菌数和有害菌的方法，如ATP法（生物化学发光检测方法）、免疫法、阻抗法、分子生物学法和显色培养基法在国外应用相当成功，但在我国由于仪器设备和检测条件的限制，还没有普及。显微镜检测法有许多缺点，只能大概了解微生物的数量和霉菌含量的多少，而无法区