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聚合酶链式反应 PCR;1、反转录PCR(RT-PCR)  2、反向PCR 3、复合PCR   4、不对称PCR   5、嵌套PCR 6、实时定量PCR ;PCR技术的基本原理;PCR的操作步骤;PCR的反应体系;(1)、PCR反应缓冲液;(2)Taq DNA聚合酶(thermus aquaticus) 0.5-5 U/100?L 酶量增加使反应特异性下降;酶量过少影响反应产量。 ;(4)模板 ①单、双链DNA均可。 ② 不能混有蛋白酶、核酸酶、DNA聚合酶抑制剂、 DNA结合蛋白类。 ③一般100ng DNA模板/100?L。 ④模板浓度过高会导致反应的非特异性增加。 ;PCR引物的设计原则;PCR循环的一般参数;标准的PCR反应条件;PCR反应的注意事项;PCR反应的特点;PCR技术的应用

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