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一、氨基酸是蛋白质的构件分子 (一)蛋白质的水解 1.酸水解:常用6mol/L HCl回流20h,水解完全,不引起消旋,但色氨酸破坏,羟基氨基酸部分水解,酰胺键水解。 2.碱水解:水解完全,会引起消旋,但色氨酸不破坏。 3.酶水解:水解不完全,不引起消旋,色氨酸不破坏,主要用于蛋白质的部分水解。 (三)氨基酸的等电点 四、氨基酸的化学反应 (一)α-氨基参加的反应 1.与亚硝酸的反应 测量氮气的体积可计算氨基酸的含量。 2.与酰化试剂的反应 可用于氨基的保护。 3.烃基化反应 可用于测定多肽链的氮末端氨基酸。 4.形成西佛碱的反应 为转氨基反应的中间步骤。 5.脱氨基反应 为氨基酸分解反应的重要中间步骤。 (二)α-羧基参加的反应 1.成盐和成酯反应 可用于羧基的保护。 2.成酰氯反应 可用于羧基的活化。 3.脱羧基反应 是生成胺类的重要反应。 4.叠氮反应 可用于羧基的活化。 (四)侧链R基参加的反应 1.酪氨酸可发生碘化、硝化、重氮反应,后者可用于检测酪氨酸。 2.组氨酸可发生重氮反应。 3.精氨酸可与环己二酮发生缩合反应,曾被用于氨基酸序列分析。 4.色氨酸可被N-溴代琥珀酰亚胺氧化,生成有色化合物,可用于色氨酸定量测定。 5.半胱氨酸可生成烷基衍生物,可用于巯基的保护。巯基可与重金属生成盐,使蛋白质失活。巯基在空气中可被氧化,金属离子对此有催化作用。 6.胱氨酸的二硫键可被还原为两个巯基。也可以被过甲酸氧化成两个磺酸基。 (三)纸层析 Rf主要与R基的极性有关,溶剂的pH可影响R基的极性,氨基酸与滤纸的吸附作用也影响Rf。 (四) 薄层层析 速度快,硅胶等支持物可以使用较强烈的显色方法。 (五)离子交换层析 离子交换树脂的结构如图所示,功能基团种类较多。 氨基酸的离子交换分离原理 若pI?pH 0,两性离子带净正电荷,若pI?pH 0,两性离子带净负电荷,差值越大,所带的净电荷越多。 氨基酸的分离过程 用氨基酸自动分析仪分析氨基酸混合物的洗脱曲线(阳离子交换剂)。 * 第3章 氨基酸 20种氨基酸的发现年代表 天冬酰氨 1806 Vauquelin 天门冬芽 甘氨酸 1820 Braconnot 明胶 亮氨酸 1820 Braconnot 羊毛、肌肉 酪氨酸 1849 Bopp 奶酪 丝氨酸 1865 Cramer 蚕丝 谷氨酸 1866 Ritthausen 面筋 天冬氨酸 1868 Ritthausen 蚕豆 苯丙氨酸 1881 Schultze 羽扇豆芽 丙氨酸 1881 Weyl 丝心蛋白 赖氨酸 1889 Drechsel 珊瑚 精氨酸 1895 Hedin 牛角 组氨酸 1896 Kossel,Hedin 奶酪 胱氨酸 1899 Morner 牛角 缬氨酸 1901 Fischer 奶酪 脯氨酸 1901 Fischer 奶酪 色氨酸 1901 Hopkins 奶酪 异亮氨酸 1904 Erhlich 纤维蛋白 甲硫氨酸 1922 Mueller 奶酪 苏氨酸 1935 McCoy et al 奶酪 (二)α-氨基酸的一般结构 氨基在α-位,为L-构型. 二、氨基酸的分类 (一)?常见的蛋白质氨基酸 1.常见的蛋白质氨基酸共二十种。 2.按化学结构分为脂肪族、芳香族和杂环族三类。这种分类方法对于研究氨基酸的合成与分解有重要意义。 3.按R-基的极性分为非极性R-基氨基酸、不带电荷的极性R-基氨基酸、带正电荷的极性R-基氨基酸、带负电荷的极性R-基氨基酸四类。这种分类方法对于研究氨基
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