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- 2019-09-21 发布于浙江
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3.科学家通过转基因技术获得了含有人生长激素基因的奶牛,如果要加速转基因奶牛的繁育,可以对此转基因奶牛进行克隆(如图所示)。请结合图示回答下列问题: —————[考向预测练 1 ]————— (1)在进行细胞培养时,要对取自转基因奶牛的组织细胞进行分散处理,形成单个细胞,这个过程中需要利用________酶处理。 (2)用于核移植的供体细胞,一般都选用传代10代以内的细胞,原因是_______________________________________ _________________________________________________。 (3)在进行原代培养时,细胞增殖的方式是____________,此外,细胞增殖还表现出____________和接触抑制等特点。 (4)将进行培养的供体细胞注入去核的卵母细胞中,去除卵母细胞细胞核的目的是_____________________。 (5)将重组细胞在培养液中培养成的重组胚胎移入受体母牛后,该母牛就会生出与供体奶牛遗传物质相同的牛犊,但也不是100%地复制,原因最可能是____________________ ________________________________________________。 (6)上述动物细胞工程中涉及的技术有_________________ ___________。转基因奶牛的克隆成功,说明了动物的________________具有全能性。 【答案】 (1)胰蛋白 (2)该种细胞代谢旺盛、分裂能力强,且遗传物质没有发生改变 (3)有丝分裂 贴壁生长 (4)使克隆出的动物个体的遗传物质几乎全部来自供体细胞 (5)生物的性状受细胞核基因和细胞质基因共同控制;生物的性状还受环境因素的影响 (6)核移植、细胞培养、胚胎移植技术 体细胞的细胞核 4.P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因,研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变。科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用。请回答下列问题: (1)切下新鲜的肝癌组织,在37 ℃下用____________消化30~40 min,在5%________培养箱中培养,培养基是模拟了人体__________的成分配制的,在培养基中加入一定量的抗生素,其目的是____________________。 (2)获取P53基因的方法通常包括________________和________________。 —————[考向预测练 2 ]————— (3)将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合,将混合物滴加至肝癌细胞上,轻轻混匀,最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞。脂质体在这个操作中的作用是_____________ _________________。 (4)为证明P53基因有抑癌作用,需将两种细胞接入多孔板中,并从次日开始检测每孔的细胞总数,绘制成如下图所示的生长曲线。请分析两条曲线分别是哪种细胞,曲线1是____________,曲线2是________________________。 【答案】 (1)胰蛋白酶 CO2 内环境 防止杂菌污染 (2)化学方法合成 从基因文库中获取 (3)将P53(目的)基因导入肝癌细胞 (4)肝癌细胞 转入P53基因的肝癌细胞 考点三 动物细胞融合与单克隆抗体 一、动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较 比较项目 动物细胞融合 植物体细胞杂交 原理 细胞膜的流动性、细胞的增殖 细胞膜的流动性、细胞的全能性 融合前处理 先使细胞分散开 先除去细胞壁 使用的酶 胰蛋白酶 纤维素酶和果胶酶 诱导手段 除物理法和化学法外,也可用灭活的病毒诱导 物理法:离心、电激、振动 化学法:聚乙二醇等试剂诱导 比较项目 动物细胞融合 植物体细胞杂交 结果 杂交细胞 杂种植株 应用 主要用于制备单克隆抗体 培育植物新品种 意义 突破远缘杂交不亲和的障碍,打破了生殖隔离,扩展了杂交的亲本组合 相同点 原生质体融合原理相同;原生质体融合的方法相似 二、单克隆抗体的制备 1.原理:一个(或一种)浆细胞(效应B细胞、B淋巴细胞)只产生一种抗体,小鼠骨髓瘤细胞能够无限增殖。因此杂交瘤细胞就具备了既能无限增殖,又能大量产生单一抗体的特征。 2.取相应B淋巴细胞前必须先注射相应抗原,否则不能获得单克隆抗体。 3.细胞融合后需经二次筛选: (1)第一次:在特定的选择性培养基上,未融合的亲本细胞(B淋巴细胞和骨髓瘤细胞)和融合的具有同种核的细胞(BB融合细胞、瘤瘤融合细胞)都会死亡,只有融合的杂种细胞(杂交瘤细胞)才能生长。这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖,又能产生单一的特异性抗体。 (2)第二次:经选择性培养的杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞(很多种杂交瘤细胞
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