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返回 专题2 课题1 课前预习·巧设计 名师课堂·一点通 重点突破 创新演练·大冲关 知识清单 案例师说 课堂强化 每课一练 了解 培养基的种类、营养要素、配制原则 理解 微生物培养过程中的无菌操作、接种 操作要求 无菌技术的操作 1.概念 人们按照微生物对 的不同需求,配制出供其生长繁殖的 。 2.种类(按照培养基的物理性质划分) (1)液体培养基:配制成的 状态的基质。 (2)固体培养基:配制成的 状态的基质,是实验室中最常用的培养基之一,微生物在其上面生长,可形成肉眼可见的 。 营养物质 营养基质 液体 固体 菌落 3.营养要素 各种培养基的具体配方不同,但一般都含有 、 、 、 ,此外培养基还需要满足微生物生长对pH、 以及 的需求。 水 碳源 氮源 无机盐 特殊营养物质 氧气 二、无菌技术 1.避免杂菌污染的措施 (1)对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行 和 。 (2)将用于微生物培养的 、 和 等器具进行灭菌。 (3)为避免周围环境中微生物的污染,实验操作应在 附近进行。 (4)实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与 相接触。 清洁 消毒 器皿 接种用具 培养基 酒精灯 火焰 周围的物 品 2.消毒和灭菌 (1)消毒: ①概念:使用 的物理或化学方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体 (不包括芽孢和孢子)。 ②常用方法: 消毒法、 消毒法、 消毒法。 (2)灭菌: ①概念:使用 的理化因素杀死 的微生物(包括芽孢和孢子)。 ②常用方法: 灭菌、 灭菌、 灭菌。 较为温和 有害的微生物 煮沸 巴氏 化学药品 强烈 物体内外所有 灼烧 干热 高压蒸汽 三、分离纯化大肠杆菌的实验操作 1.制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的一般步骤 计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。 2.纯化大肠杆菌 微生物接种的最常用方法是 和 。 (1)平板划线法:通过接种环在琼脂固体培养基表面 的操作,将聚集的菌种逐步 到培养基的表面。 (2)稀释涂布平板法:将菌液进行一系列的 ,然后将不同稀释度的菌液分别 到琼脂固体培养基的表面,进行培养。 平板划线法 稀释涂布平板 法 连续 划线 稀释分散 梯度稀释 涂布 3.结果分析 (1)如果接种了大肠杆菌的培养基上生长的菌落颜色、形状、大小基本一致,说明 操作符合要求。 (2)若培养基上出现了其他菌落,则说明接种过程中被 。 (3)未接种大肠杆菌的空白对照的培养基在培养过程中若 ,则说明灭菌不彻底,实验失败。 接种 杂菌污染 长出菌落 四、菌种保存 1.临时保藏法 适用于 使用的菌种。 (1)过程: ①将菌种接种到试管的 培养基上,合适温度下培养。 ②保藏:菌落长成后,放
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