【创新方案】高中生物 专题2 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数名师优质课件 新人教版选修1.pptVIP

返回 专题2 课题2 课前预习·巧设计 名师课堂·一点通 重点突破 创新演练·大冲关 知识清单 案例师说 课堂强化 每课一练 了解 实验设计中对照实验的设置方法 理解 筛选微生物的原理、选择培养基的 配制及其对微生物的选择作用 1.对土样的选取和选择培养基的配制 2.对分解尿素的细菌的计数 一、菌株筛选 1．自然界中目的菌株的筛选 (1)依据：根据它对 的要求，到相应环境中去寻找。 (2)实例：PCR技术中用到的耐高温的Taq细菌就是从 中筛选出来的。 生存环境 热泉 2．实验室中目的菌株的筛选 人为提供有利于 生长的条件(包括营养、温度、pH等)，同时 其他微生物的生长。 3．选择培养基 在微生物学中，将允许 生长，同时 其他种类微生物生长的培养基，称作选择培养基。 目的菌株 抑制或阻止 特定种类微生物 抑制 或阻止 二、实验设计及操作 1．实验设计 (1)土壤取样： ①取样条件：富含 的土壤表层，酸碱度接近 且潮湿。 ②取样部位：距地表约 cm的土壤层。 (2)样品稀释： 样品的稀释程度直接影响平板上生长的 ，选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证菌落数在 之间，便于计数。 有机质 中性 3～8 菌落数目 30～300 (3)微生物的培养与观察(以细菌为例)： 将培养基平板置于 温室中培养1～2 d，每隔24 h统计一次 数目，最后选取数目 时的记录作为结果。 (4)细菌的计数： 当菌落数目稳定时，取同一 下的3个平板进行计数，求出 ，并根据所对应的 计算出样品中细菌的数目。 30～37℃ 稳定 菌落 稀释度 平均值 稀释倍数 2．操作提示 (1)无菌操作： ①取土样的用具在使用前都需要 。 ②应在 旁称取土壤。并在火焰附近将土样倒入烧瓶中，塞好棉塞。 ③在稀释土壤溶液的过程中，每一步都要在 旁操作。 (2)培养过程中应设置重复组：同一稀释度下应涂布 平板，才能增强实验的说服力与准确性。 灭菌 火焰 火焰 3个 (3)实验中应设置对照：主要目的是排除任何其他可能原因对实验结果的影响，提高实验结果的可信度。如空白对照组，观察培养物中是否有 污染；设置牛肉膏蛋白胨培养基，观察选择培养基是否具 作用等。 杂菌 筛选 三、课题延伸 对于分离出的分解尿素的细菌还需借助生物化学方法作进一步鉴定。 1．原理 细菌合成的 将尿素分解成NH3，使培养基 增强，pH ，因此，可通过检测 来判断该化学反应是否发生。 脲酶 碱性 pH的变化 升高 2．方法 在以 为唯一氮源的培养基中加入 指示剂，培养某种细菌，若指示剂变红，则pH升高，说明该种菌能 。 尿素 酚红 分解尿素 1．读教材P21相关内容，归纳并回答下列问题。 (1)从自然界中，筛选某种微生物时，确定取样环境依据是什么？ 提示：依据目的菌株对生存环境的要求，到相应的环境中取样。 (2)分析教材P22左上方侧栏的本课题使用的培养基配方，该培养基对微生物具有选择作用吗？若有，是如何进行选择的？ 提示：有选择作用。该培养基配方中，尿素是唯一的氮源，只有能够合成脲酶的微生物才能利用尿素，才能在该培养基上生长，其他微生