【创新方案】高中生物 专题5 课题1 DNA的粗提取与鉴定名师优质课件 新人教版选修1.pptVIP

返回 专题5 课题1 课前预习·巧设计 名师课堂·一点通 重点突破 创新演练·大冲关 知识清单 案例师说 课堂强化 每课一练 了解 DNA的理化性质 理解 DNA粗提取的原理及鉴定的原理和方法 DNA的粗提取和鉴定方法 一、提取DNA的方法 1．提取生物大分子的基本思路 (1)选用一定的 方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。 (2)DNA粗提取方法：利用DNA与 等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA，去除其他成分。 物理或化学 RNA、蛋白质和脂质 2．DNA粗提取与鉴定的原理 (1)分离原理： DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的 溶液中 不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分 ，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 NaCl 溶解度 溶解 (2)提纯原理： ①DNA不溶于 溶液，但细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。 ②蛋白酶能水解蛋白质，但是对 没有影响。 ③大多数蛋白质不能忍受 ℃的高温，而DNA在80℃以上才会 。 ④洗涤剂能够瓦解 ，但对DNA没有影响。 (3)鉴定原理： 在沸水浴的条件下，DNA遇 会被染成蓝色。 酒精 DNA 60～80 变性 细胞膜 二苯胺 二、实验设计 1．实验材料的选取 选用 含量相对较高的生物组织。 2．破碎细胞 (1)动物细胞的破碎——以鸡血为例： 在鸡血细胞中加入一定的 ，同时用 后，收集滤液即可。 (2)植物细胞的破碎——以洋葱为例： 先将洋葱切碎，然后加入一定的 和 进行充分搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。 DNA 蒸馏水 玻璃棒搅拌过滤 洗涤剂 食盐 3．去除滤液中杂质 (1)方案一：通过控制 溶液的浓度去除杂质。 (2)方案二：直接向滤液中加入 ，反应10～15 min，嫩肉粉中的 酶能够分解蛋白质。 (3)方案三：将滤液放在 的恒温水浴箱中保温10～15 min，注意严格控制温度范围，使 沉淀而 分子还未变性，可以将DNA与蛋白质分离。 NaCl 嫩肉粉 木瓜蛋白 60～75℃ 蛋白质 DNA 4．DNA的进一步提纯 利用DNA不溶于 这一原理，可从体积分数为 中析出较纯净的DNA，此时DNA的状态为 。 5．DNA的鉴定 将丝状DNA溶解于5 mL的物质的量浓度为 溶液中，再加入4 mL的 试剂，进行沸水加热5 min，待试管冷却后，观察试管中颜色变化，二苯胺要 。 冷却的酒精 95%的冷却酒精 白色丝状物 2 mol/L NaCl 二苯胺 现配现用 三、操作提示 (1)以血液为实验材料时，每100 mL血液中需要加入3 g ，防止 。 (2)加入洗涤剂后，动作要 ，否则容易产生大量的 ，不利于后续步骤的操作。加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免 ，导致DNA分子不能形成 。 (3