大黄不同炮制品中游离蒽醌的含量测定.docVIP

PAGE PAGE 1 大黄不同炮制品中游离蒽醌的含量测定 　　摘要：目的：通过HPLC法比较大黄不同炮制品中大黄酸、大黄素的含量。方法：采用Shim-packVP-ODS（150mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相为甲醇-水（70：30，磷酸调至pH值=3）；柱温：24℃；流速：1.0ml/min；检测波长：437nm。结果：大黄酸线性范围为0.0132～0.132mg，r=0.9991，大黄素线性范围为0.0066～0.132mg，r=0.9999。结论：大黄的不同炮制品中大黄酸、大黄素的含量不同，以生大黄中大黄素、大黄酸的含量最多，大黄炭中大黄素的含量最少，酒大黄中大黄酸的含量最少。 　　关键词：大黄酸大黄素HPLC生大黄熟大黄酒大黄大黄炭 　　大黄为蓼科植物掌叶大黄（RheumpalmatumL.）、唐古特大黄（RheumtenguticumMaxim.exBalf.）或药用大黄（RheumofficinaleBaill.）的干燥根及根茎。2005版药典一部规定大黄饮片为大黄除去杂质，洗净，润透，切厚片或块，晾干；酒大黄为取净大黄块，加酒拌匀，闷透，至锅内，用文火炒至规定的程度时，取出，放凉。照酒炙法炒干；熟大黄为取净大黄块，照酒炖法或蒸至内外均呈黑色，加酒拌匀，加入液体辅料拌匀，置适宜的容器内，加热蒸透或至规定的程度时，取出，干燥；大黄炭为取净大黄块，照炒炭法炒至表面焦黑色、内部焦褐色。酒大黄善清上焦血分热毒。用于目赤咽肿，齿龈肿痛。熟大黄泻下力缓，泻火解毒。用于火毒疮疡。大黄炭凉血化瘀止血。用于血热有瘀出血症。大黄中其主要活性成分为大黄蒽醌衍生物如大黄素、大黄酸、大黄酚等。本文考察了大黄不同炮制品中大黄酸、大黄素的含量，经测定在不同炮制品中大黄酸、大黄素在生大黄中的含量最多，大黄炭中大黄素的含量最少，酒大黄中大黄酸的含量最少。 　　实验部分 　　1仪器与材料 　　岛津LC-10ATVP高效液相色谱仪，SPD-10A紫外分析仪，CTO-10AS柱温箱，DGU-12A脱气机。KQ-25DE型数控超声波清洗器。大黄酸标准品（中国药品生物制品有限公司生产，批号为0757-200005），大黄素标准品（中国药品生物制品有限公司生产，批号为110756-200110），生大黄[3]（天津中药饮片厂生产，批号0509020），熟大黄（天津中药饮片厂生产，批号0509016），酒大黄（天津中药饮片厂生产，批号0508026），大黄炭（天津中药饮片厂生产，批号0506023）。甲醇为色谱纯，其它试剂均为分析纯，水为二次蒸馏水。 　　2方法与结果 　　2.1色谱条件Shim-packVP-ODS（150mm×4.6mm，5μm）色谱柱；流动相为甲醇-水（70：30，磷酸调至pH值=3）；柱温：24℃；流速：1.0ml/min；检测波长：437nm。进样量为20μl。 　　2.2对照品溶液的制备 　　2.2.1制备大黄酸对照品溶液：称取大黄酸对照品6.6mg，然后使用甲醇定容至50ml容量瓶中，就得到了大黄酸对照品储备液体。 　　2.2.2制备大黄素对照品溶液：和上面的方法一样，也同样可以制得大黄酸对照品储备液体。 　　2.3供试品溶液的制备 　　取生大黄、熟大黄、大黄炭、酒大黄药材各20g，粉碎，过24目筛。精确称取药品粉末生大黄5.0056g、熟大黄5.0053g、大黄炭5.0049g、酒大黄5.0030g，分别置于4个50ml容量瓶中，加入40ml氯仿，于38℃超声[1]提取30min， 　　静置24h过滤，挥干氯仿，加适量甲醇转溶于50ml容量瓶中。用移液管从50ml溶液中取1ml转移至10ml容量瓶中定容，备用。 　　2.4线性关系考察 　　2.4.1大黄酸线性关系考察 　　精密吸取0.5ml、1ml、2ml、4ml、6ml、8ml和10ml大黄酸对照品溶液，并加甲醇定容于10ml量瓶中，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值对进样量进行线性回归，得回归方程Y=673755.99X-33059.11，r=0.9991，表明大黄酸在0.0132～0.132mg范围内呈现良好的线性关系。 　　2.4.2大黄素线性关系考察 　　精密吸取0.5ml、1ml、2ml、4ml、6ml、8ml和10ml大黄素对照品溶液，并加甲醇定容于10ml量瓶中，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值对进样量进行线性回归，得回归方程Y=249099.313X367，r=0.9999， 　　表明大黄素在0.0066～0.132mg范围内呈现良好的线性关系。 　　2.5供试品含量测定 　　2.5.1大黄酸的含量测定 　　取各个供试品按“2.3”项下制备供试品溶液，按“2.1”项下色谱条件进行测定，结果见表1。 　　2.5.