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选修1 生物技术实践 2015.2.7 1．临床使用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。回答下列问题： (1)取该单菌落适当稀释，用_______法接种于固体培养基表面，在37 ℃培养箱中培养24 h，使其均匀生长，布满平板。 (2)为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A、B、C、D 四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A__________________；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B__________________；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________________________________________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的__________________。 (3)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选用抗生素__________。 2．普通酵母菌直接利用淀粉的能力很弱，有人将地衣芽孢杆菌的α淀粉酶基因转入酵母菌中，经筛选得到了可高效利用淀粉的工程酵母菌菌种(过程如图甲所示)。 (1)图甲中，为达到筛选目的，平板内的固体培养基应以________作为唯一碳源。②、③过程需重复几次，目的是_____________。 (2)某同学尝试过程③的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图乙所示。该同学的接种方法是___________；推测该同学接种时可能的操作失误是__________________________。 (3)以淀粉为原料，用工程酵母菌和普通酵母菌在相同的适宜条件下密闭发酵，接种________菌的发酵罐需要先排气，其原因是__________________________________________。 3．微生物的培养中，制备培养基的过程是： 无菌技术：主要包括 常用灭菌方法：灼烧灭菌 ；干热灭菌——主要针对 等；高压蒸汽灭菌——主要针对 等。 制备固体培养基最后要将平板 ，其主要目的是 4、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数：计数方法： 法和显微镜直接计数法。前者为了增强实验的说服力和准确性，则需设置 ，一般选择菌落数在 的平板进行计数。过程： 鉴定分解尿素的细菌用 5、分解纤维素的微生物的分离：纤维素酶包括 ，鉴定纤维素分解菌所用试剂： 。可根据是否产生 来筛选纤维素分解菌。分离流程： 6．该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量。在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________；然后，将1 mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1 mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为______________。 7．与微生物培养基相比，植物组织培养的培养基常需添加生长素和________________，这些植物激素一般需要事先单独配制成________保存备用。 8、纯化菌株时，通常使用的划线工具是________。划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌，第二划线区域所划的第一条线上无菌落，其他划线上有菌落。造成划线无菌落可能的操作失误有_________________________________________。 9．制作泡菜时，所用盐水需煮沸，其目的是__________为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是______________________；制作过程中影响亚硝酸盐含量的因素有______、__________和__________等。从开始制作到泡菜品质最佳这段时间内，泡菜液逐渐变酸。这段时间内泡菜坛中乳酸菌和其他杂菌的消长规律是________________，原因是____________________