泌尿系统与男性生殖系统药效学的设计方法.pptVIP

三、动物模型建立方法 (一)激素法(丙酸睾丸素)模型 1．原理 根据前列腺增生由体内性激素失衡有关理论，添加外源性激素可使前列腺迅速增生。 2 操作方法 小鼠每日皮下注射丙酸睾丸素5mg／kg，21日后形成前列腺肥大，可开始进行试验治疗。 3．造模成功指标与药物疗效观察 镜检前列腺，与空白对照组比较增生程度，或取前列腺称重计算前列腺指数以及测前列腺中DNA含量与空白对照组比较，药效可根据前列腺镜检、前列腺指数、DNA含量、磷酸酶含量来评价。 4．注意点 选用小鼠尽可能体重相近，鼠龄相同，雄性激素水平无显着差异。 (二)老年犬前列腺增生模型 1．原理 犬的前列腺增生与人发病机制相似。因此，犬的前列腺增生与人类的前列腺增生最为相近，是迄今公认为研究人类前列腺增生，观察药物的治疗作用合适的动物模型。 2．动物和实验步骤 选取雄性杂种家犬，先经直肠指诊断及前列腺明显增大者，再经B超检查测定前列腺体积，证实为前列腺增大者供实验。 3．药物疗效观察 用B型超声显象法测定前列腺体积(近似值：最大横径x纵杆x厚径)，比较用药前后体积变化。 4．注意点 (1)犬前列腺增生与年龄有关，实验用犬宜选老年(7—10岁龄)前列腺增生明显者。 (2)从外地(非本地动物房)选来的犬必须在本地动物房饲养2个月使之适应实验环境和饮食条件。 (三)小鼠尿生殖窦植入法模型 1．原理 胚胎与成年前列腺细胞相互作用，诱导成年前列腺细胞增小(可能是由于成年前列腺胚胎生长能力的重新恢复)。 2．操作方法 取体重250—300g，7—10周龄雄性大鼠在戊巴比妥钠60mg/kg(体重)腹腔注射麻醉下剖开腹部，仔细分离前列腺，用针尖或有锋利尖端的小镊向前列腺内植入16日胎鼠的尿生殖窦组织，对照组进行同样手术操作，但仅用针头探刺两次作为假手术，然后缝合腹壁。 3．造模成功的指标和药物疗效观察指标 同激素法模型。 4，注意点 (1)胎鼠的尿生殖窦诱导前列腺增生有雄激素依敕性，必须选用成年雄性小鼠(7—10周龄)。 (2)增生程度与胚胎尿生殖窦植入的数目成比例，所以每只小鼠植入的胎鼠尿生殖窦的数目必须相同。 (3)尿生殖窦不同部分植人诱导成年大鼠前列腺增生度差异大，所以植入小鼠前列腺的胎鼠尿生殖窦必须无明显差异。 第五节 前列腺炎药 一、实验设计的医学基础 前列腺炎是泌尿科疾病，症状包括会阴不适，尿痛，残尿感，腰痛，尿道灼热，尿频，小腹痛等主要症状。根据其产生的病因．临床分为细菌性和非细菌前列腺炎两类。前列腺炎多由大肠杆菌，金黄色葡萄球菌感染所致。而非细菌性炎症。主要由炎细胞浸润腺腔梗阻，间质纤维化产生，治疗以清热解毒，活血祛瘀、利水通淋。中医认为，前列腺炎属“癃闭”范畴。 二、药效学研究的实验设计 (一)对前列腺炎药动物模型的治疗作用试验 1. 常用动物模型 (1)大鼠实验性非细菌前列腺炎病理模型：以l％角叉菜胶生理盐水0．1ml注射在前列腺头相连接的精囊内。 (2)大鼠前列腺纤维增生炎症病理模型：以25％消痔灵注射0．2ml注射囊内侧前列腺背。 (3)大鼠实验性细菌前列腺病理模型：以大肠杆菌生理盐水悬液，注射在与前列腺头相接的精囊内。 2．观察指标 (1)前列腺病理形态学检查。 (2)前列腺液检查：检查其细胞数。对实验性细菌性前列腺炎模型还叮作细菌培养，检查其菌数。 (3)卵磷质小体密度(前列腺液中)。 3．方法学评价 各种方法造成的模型各有特点：注射消痔灵形成实验性前列腺炎，利用药物药理作用特点而形成，直接、简单方便；实验性细菌性前列腺炎的模型和实验性非细菌性前列腺炎模型制做方法易行而可靠，炎症周期适合抗炎药的筛选。 (二)其他试验 1．抗菌试验 由于本病部分是由细菌感染而发，故可以抗菌试验为其药效学依据。 2．抗炎试验 可用一般抗炎方法进行。 3．止痛试验 用以衡量治疗药物的辅助作用。 (三)阳性对照药物 前列康、氧氟沙星、前列宁等。 三、动物模型的建立方法 (一)非菌性前列腺炎的模型的建立 1．原理 注入角叉菜胶生理盐水．能引起前列腺液检验指标的显著改变，而注入等量灭菌生理盐水则不能引起显著改变。 2，操作方法 麻醉动物、切口、暴露前列腺，在前列腺头叶上的精液囊注入1％角叉菜胶生理盐水溶液，术后缝合，术后24h可形成非细菌性前列腺炎的模型。 3．造模成功指标 前列腺液中白细胞数增