关于缺血性心脏病药效学研究的实验设计.pptVIP

(五)肠系膜上动脉夹闭性(sMAO)休克模型 1 原理 休克的发生可能与肠道缺血再灌注时自由基及其他多种毒物质的产生有关。自由基不仅导致肠组织的脂质过氧化损伤，也可造成肠外生命器官如心、肺、肝等组织的脂质过氧化损伤，自由基参与此休克时的细胞损伤过程。 2．操作方法 取纯系大鼠，体重250g左右，用13．3％乌拉坦与l％氯醛糖混液0 6ml／100g(体重)腹腔注射麻醉，气管插管，自主呼吸。左颈总动脉插三通开关，按压力换能器，连于二道生理记录仪记录血压。右颈外静脉插管供给药用。腹部正中切于，生理盐水纱布保护下分离出肠系膜上动脉，以上创伤动脉夹夹闭，关闭腹腔，动物全身肝素化(80ul／100g(体重)]，关闭动脉1h后松夹。给药组可在松夹前20min右侧颈外静脉注入试验药物。通过塑料三通左颈总动脉取血，分别测定夹闭前、松夹后1h、2h三个时间的全血谷胱肽过氧化物酶活力。至松夹2h，取动物心、肝、肾准确称量1g，测定GSH活力，按DTMB直接法测定。以Folim—酚试剂法作蛋白定量。对照组用等容量生理盐水。其余条件均同给药组。 3．造模成功的指标和疗效观察 造模成功的动物在松夹即刻，松1h、2h MAP、脉压均下降。全血及心、肝、肾组织活力降低。受试药物应能使MAP升高，全血及心、肝、肾组织GSH-Px活力明显升高。 4 注意点 ①在分离大鼠肠系膜上动脉时，尽量避免出血或过多牵拉。用无创伤动脉夹闭要完全。②作匀浆前心、肝、肾组织尽量剪碎，匀浆时每次时间和频率要保持一致。③必需注意各试剂的配制和保存方法，以免影响结果。④按酶学反应的温度、PH和时间进行，同时须准确计时和读数。 心律失常药 一、实验设计的医学基础 心律失常是指心脏活动节律不正常。正常情况下，心搏的激动起源于窦房结，节律基本规则，频率有—定范围，沿窦房结——左右心房——心室的传导途径，以一定的速度传播到左右心室。凡偏离这种正常心律的心脏搏动都属心律失常，它由心脏中节律性或激动传导障碍或二者同时失常引起。心律失常同时涉及心脏电活动和机械性搏动的节律，但虽明显最精确地从心脏电活动的改变中反映出来，因此心电图是反映心律的最重要最直接的指标。心脏的功能、血供、神经调节等任—项异常均部分或完全引起心律失常，如各种器质性心脏病、全身性疾病(感染、缺氧、中毒、电解质紊乱、药物作用)、某些系统疾病(甲亢、颅内出血等)、麻醉、胸腔手术、自主神经功能失调等。 中医学中类似心律失常症状的描述散见于心悸、怔忡、眩晕、昏厥等病症中，病位以心为主，与肝、脾、肾、胃等关系密切，表现为虚(气、血、脏腑)、实(瘀、滞、痰饮)两类，虚多见于气血不足，阴阳失调和血脉瘀阻等原因引起。 心律失常的治疗首先是确定病因，明确心律失常的发病因素及其相互关系，在治疗病因的同时根据需要治疗心律失常。现代医学抗心律失常的药物主要分为四类：钠通道阻断剂，它主要抑制内向快速除极，钠流动，从而延长动作电位上升速度，主要分为三个亚类：In除极作用中等，而复极延长，如奎尼丁、普鲁卡因酰胺、双异丙肾上腺素等；Ib兼有促进K外流作用，除极作用弱，复极作用缩短(对P—R、QPS、QT无影响)，如利多卡因、美西律、妥卡尼、苯妥英钠；lc除极作用强，复极作用甚小，如普罗帕酮、氟卡胺、Lorcninine等。Ⅱ类为肾上腺素能受体阻滞剂，如Nadolol、Pindolol、Sotolol、Timolol等。Ⅲ类为复极化抑制剂，如胺碘酮、Stolol等。Ⅳ类为钙通道调节剂，阻断钙通道Ca内流，使心肌细胞去极化减慢。 中医可用补益养血、滋阴和阳疏通血脉等方药，防治“脉结代”，具抗心律失常的作用。受试中药的其他相关药效作用如补益、理气等，可根据受试物的情况而增加。 二、药效学研究的实验设计 (一)对心律失常模型的防治作用 1．常用的动物模型 主要两类模型。 过速型心律失常模型。 (1)电刺激心脏诱发心律失常：适度的电刺激接近自然异位冲动，可诱发心律失常。 (2)外科手术或机械损伤形成的心律失常：由传导延缓和折返激动以及舒张自动除极和异常自律性所致。包括：①冠状动脉结扎形成缺血性心律失常；②冠状两期结扎形成心律失常。 (3)化学药物诱发的心律失常：常用的有①肾上腺素诱发的心律失常。肾上腺素兴奋受体，心脏自律性、传导性、应激性及心率提高，诱发室性心律失常，②氯仿诱发小鼠的心室纤颤。可能与自主神经及具递质释放、或肾上腺髓质分泌肾上腺索，以及对心脏的直接作用有关。③乌头碱诱发的心律失常。能使钙通道开放，促进细胞去极化，加速起搏点的自柞性，形成多源性异位节律，缩短不应期。④弧心苷诱发的心律失常。直接抑制Na—