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- 2019-09-23 发布于浙江
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基因工程的基本操作程序 基因工程的基本操作程序 1.目的基因的获取 2.基因表达载体的构建 3.将目的基因导入受体细胞 4.目的基因的检测与鉴定 目前被较广泛提取使用的目的基因有:苏云金杆菌抗虫基因、人胰岛素基因、人干扰素基因、种子贮藏蛋白基因、植物抗病基因等。 基因操作的基本步骤 一、提取目的基因—— 将需要的基因从供体生物 的细胞内提取出来。 供体生物细胞 取出DNA 用限制酶剪去多余部分 目的基因 限制酶 获得目的基因的方法 1. 从基因文库中获取目的基因 什么是基因文库? 什么是部分基因文库? 怎样从基因文库中得到我们所需的目的基因? 目的基因的有关信息与什么相联系? 2.人工合成基因法——PCR扩增技术 获得目的基因的方法 PCR (polymerase chain reaction) ——聚合酶链式反应 是一项再生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。通过此技术,可获取大量的目的基因。 PCR技术 原理: 前提: 过程: PCR扩增仪 DNA双链复制的基本原理 一段已知目的基因的核苷酸序列 目的基因DNA受热变性,解链; 引物与单链互补结合; 合成链在DNA聚合酶作用下进行延伸。 二、基因表达载体的构建——基因工程的核心 基因操作的基本步骤 目的: 所需物质: 使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以遗传给下一代,同时使目的基因能够表达和发挥
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