优质课DNA的粗提取与鉴定课件.pptVIP

优质课DNA的粗提取与鉴定;⑴ DNA的溶解性;4、DNA的溶解性 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反;DNA不溶于酒精溶液， 但细胞中某些蛋白质则溶于酒精。 将DNA与蛋白质进一步分离。;;试剂：;（一）实验材料的选取;（一）实验材料的选取;动物细胞的破碎较易，以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水 ，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可;2、植物细胞 ①植物细胞需要先用一定的洗涤剂溶解细胞膜;讨论：如果研磨不充分，会对实验结果产生怎样的影响？;思考：加入蒸馏水的目的是什么？;1. DNA的溶解性;DNA的析出;思考：加蒸馏水的目的是？;为什么反复地溶解与析出DNA，能够去除杂质？ ;讨论：方案二与方案三的原理有什么不同？;（四） DNA的析出与鉴定;;2. DNA的鉴定;1、以血液为实验材料时，每100ml血液中需要加入3g柠檬酸钠，防止血液凝固。 2、加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫，不利于后续步骤的操作。加入酒精和玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。 3、二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。;观察你提取的DNA颜色，如果不是白色丝状物，说明DNA中的杂质较多；二苯胺鉴定出现蓝色说明实验基本成功，如果不呈现蓝色，可能所提取的DNA含量低，或是实验操作中出现错误，需要重新制备;⑴过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液 获得含核物质的滤液 ⑵过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl溶液 获取纱布上的DNA粘稠物 ⑶过滤溶解有DNA的2mol/LNaCl溶液 得到含DNA的滤液 ;第一次搅拌加蒸馏水的鸡血细胞液 加速了鸡血细胞的破裂(细胞膜和核膜的破裂)，从而释放出DNA 第二次搅拌加2mol/LNaCl溶液的滤液 目的是使DNA充分溶解在2mol/LNaCl溶液中 第三次搅拌加蒸馏水至0.14mol/LNaCl溶液 稀释NaCl溶液,析出DNA黏稠物 第四次搅拌放入2mol/LNaCl溶液中纱布上的粘稠物 使DNA黏稠物充分溶解在2mol/LNaCl溶液中 第五次搅拌体积分数为95%的酒精 ;本实验两次用蒸馏水;实验成功的关键及注意事项;1.材料中核??质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水的量不够