第三章代谢调节与代谢工程.pptVIP

主讲内容 3.1 酶活性的调节 3.2 酶合成的调节 3.3 代谢调节 3.4 代谢工程 3.1 酶活性的调节 微生物细胞的代谢调节方式： 可调节营养物质透过细胞膜而进入细胞的能力； 通过酶的定位以限制它与相应底物的接近； 调节代谢流，该调节方式最为重要，它包括调节酶的合成量和调节现成酶分子的催化活力。 3.1.2 调节方法 1. 定义：蛋白质分子中的一个或者多个氨基酸残基与一化学基团共价连接或者解开，使其活性改变的作用。 2. 化学基团：磷酸基、甲基、乙基、腺苷酰基。 蛋白质的共价部位：氨基酸残基上的羟基。 3. 分类：可逆、不可逆。 1、 可逆共价修饰 大多数共价调节是通过特定部位的丝氨酸、苏氨酸、酪氨酸的侧链（-OH）的磷酸化和去磷酸化来调节的。 2、 不可逆共价修饰 酶原：必须在一定条件下，去掉一个或者几个特殊的肽 键，从而使酶的构象发生一定的变化才有活性。 名称：变构效应/别构效应/副位效应 定义：是指一种小分子物质与一种蛋白质分子发生可逆的相互作用，导致这种蛋白质的构象发生改变，从而改变这种蛋白质与第三种分子的相互作用。 别构酶：具有别构作用的酶成为变构酶。 协同作用 定义：是指酶蛋白分子的一个位点与配基的结合会影响该酶蛋白的另一个位点与基质的结合。 正向协同作用：起始配基的结合促进酶蛋白分子的另一个位置的更多的基质的结合。 负向协同作用：这种结合使进一步的结合受阻。 酶合成调节：主要指通过调节酶合成的量来控制微生物 代谢速度的 调节机制。这类调节是在基 因水平（原核生物主要在转录水平上）上 进行。 1、 诱导作用 概念： 诱导物：是指能起诱导作用的化合物。 安慰诱导物：酶基质的结构类似物，它们不能作基质被酶转化，却 是出色的诱导物。 诱导作用的分子机制： Jacob与 Monod 最先提出诱导作用模型，也叫操纵子模型。 操纵子是一组功能上相关的基因，由启动基因（Promoter）、操纵基因（Operater）、结构基因（Structural gene）三部分构成。 另外，调节基因主要是合成阻遏物 若是由于某种原因，调节基因或者操纵基因发生突变后，阻遏物失去同操纵基因结合的能力或者使突变后的操纵基因失去对阻遏物的亲和力。此时即使没有诱导物，RNA聚合酶也能转录。 这种突变称为组成性突变。 组成型突变株的获得 在诱导物（低浓度）为限制性基质的恒化器中筛选 将菌株轮番在有、无诱导物的培养基中培养 使用诱导性很差的基质 使用阻遏诱导作用的抑制剂 提高筛选效率 2、 分解代谢物阻遏 定义：由底物分解过程中产生的代谢物引起的，这种阻遏现象称为分解代谢产物阻遏。 现象：若微生物的培养基中存在一种以上可利用的养分，通常它们会先分解那些最易利用的基质，只有该基质耗竭后才开始分解第二种基质。 分解代谢物的分子机制 分解代谢物阻遏作用的克服 不使用阻遏性碳源。 出于经济问题，必须使用阻遏性碳源，则可用过程补糖的方法。 使用不能代谢的诱导物的类似物、或者缓慢补入诱导物、或者只能使用缓慢代谢的诱导物的衍生物。 3、 反馈调节 反馈调节一般分为反馈抑制和反馈阻遏两种形式： 反馈抑制作用是末端代谢产物抑制其合成途径中参与前几步反应的酶（往往是催化第一步反应的酶）。 反馈阻遏作用是末端代谢产物阻止整个代谢途径酶的合成作用。 避开末端代谢产物的反馈调节作用的方法 ： 1）从遗传上改造微生物， 使之对末端产物反馈调节作用不敏感。 2）改变培养环境条件， 以限制末端代谢产物在细胞内部的积累。 反馈抑制 分支途径的调节方式------末端产物的调节 （1）同功酶：同功酶是几种在一个细胞中催化同一反应的酶。他们通常催化分支途径中头一个酶，分别受不同的末端产物的反馈抑制。 （2）协同反馈抑制： 只有一种酶受反馈调节控制，要抑制或者阻遏这种酶需要分支代谢途径中的所有末端产物都过量存在，单个末端产物的积累对该酶的催化活性几乎没有影响。 （3）累积反馈抑制：分支途径的每一个末端产物的积累只能部分的抑制或者阻遏途径中的第一个酶，只有在所有的末端产物都过量存在时，才会完全抑制或者阻遏该酶。 （4）顺序反馈抑制 ：分支代谢途径中的末端产物，不能直接抑制代谢途径中的第一个酶，而是分别抑制分支