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四、无义变化介导的mRNA降解是真核细胞mRNA监视系统 无义变化介导的mRNA降解 (nonsense-mediated mRNA decay, NMD） 当在同一阅读框架内的翻译终止密码子UAA、UAG或UGA提前出现在最后两个外显子交界处上游约50 nt处时，mRNA被迅速降解。这些错位终止密码子被称为成熟前终止密码子（premature termination codons, PTC），可以来自突变、重组、不完全或不正确剪接。 无义变化介导的mRNA的降解 意义： 可以使某些异常的mRNA在被有效地翻译成蛋白质前得到清除 ，这个mRNA监视系统可以防止非正常截短的蛋白质的合成 。 NMD在进化过程中发挥了重要作用，使真核细胞更容易探究由于DNA重排、突变或不同剪接方式所形成的新基因。 免疫系统细胞的发育过程中也很重要，重排基因产生的这类mRNA被NMD系统迅速降解，避免了截短蛋白质的细胞毒作用。 RNA干涉（RNAi） 安德鲁·法尔（2006年3月14日） 克雷格·梅洛（2006年3月14日） RNA干涉可以使转录后的基因沉默 RNA干涉 在高等真核生物中发现有一类小RNAs (small RNAs)介导的特殊基因的沉默。这是由于此类小RNAs与mRNAs（经常是3?UTR）相互作用，导致mRNA降解或者翻译抑制，使mRNA及其相应基因无法表达而沉默（silence）。 控制至少某些生物体的适时发育。它也是一种保护生物体免受RNA病毒侵袭和控制转座子活性的机制 。 意义： RNAi发现的过程 RNAi现象早在1993年就有报道： 将产生紫色素的基因转入开紫花的矮牵牛中，希望得到紫色更深的花，可是事与愿违，非但没有加深紫色，反而成了白色。当时认为这是矮牵牛本来有的紫色素基因和转入的外来紫色素基因都失去了功能，称这种现象是“共抑制”。 1995年，康奈尔大学的Su Guo博士用反义RNA阻断线虫基因表达的试验中发现，反义RNA（anti sense RNA和正义RNA（sense RNA）都阻断了基因的表达，他们对这个结果百思不得其解。 直到1998年，Andrew Fire的研究证明，在正义RNA阻断了基因表达的试验中，真正起作用的是双链RNA。这些双链RNA是体外转录正义RNA时生成的。于是提出了RNAi这个词。 RNAi的作用机理 首先是在线虫，果蝇，斑马鱼等生物体内阐明的。 生物体内的双链RNA可来自于RNA病毒感染，转座子的转录产物，外源导入的基因。这些来源的双链RNA诱发了细胞内的RNAi机制，结果是病毒被清除，转座子的表达被阻断，外源导入基因表达被阻断同时，与其同源的细胞基因组中的基因表达也被阻断。 microRNA microRNAs (miRNAs)是一种大小约21—23个碱基的单链小分子RNA，是由具有发夹结构的约70-90个碱基大小的单链RNA前体经过Dicer酶加工后生成，不同于siRNA（双链）但是和siRNA密切相关。 miRNAs参与调控基因表达，但其机制尚在进一步研究当中。 第一个被确认的是在线虫中首次发现的lin-4和let-7，随后多个研究小组在包括人类、果蝇、植物等多种生物物种中鉴别出数百个miRNAs。 microRNA在核内的加工 机制（可能） miRNA 转录前体 (Pri-miRNA) 首先在核内被 Rnase Ⅲ 核酸酶 Drosha 加工成约70个核苷酸长的发夹状的 RNA 在 Exportin5 的帮助下从核内进入胞质内 在 Dicer 酶的作用下，单链的 miRNA 进入一个核糖蛋白复合体 miRNP（ RISC）。 miRNA 通过与靶基因的3‘ UTR 区互补配对，指导 miRNP 复合体对靶基因 mRNA 进行切割或者翻译抑制。 MiRNA 到底是抑制还是切割取决于 miRNA 与靶序列互补配对的程度，互补配对高的可能进行切割，而配对低的就只是抑制。植物的 miRNA 与靶基因配对程度高多数是进行切割，而动物中 miRNA 与靶序列的配对性不好，多数进行翻译抑制。 第二套机制（可能） 纽约大学的研究人员利用miR—125b和let-7这两种代表性的miRNAs发现哺乳动物细胞与miRNAs部分互补的mRNAs的浓度降低了，而且这种作用是由于加速的脱腺苷化（deadenylation）： miRNAs迅速的将mRNAs上poly（A）尾巴脱去，造成了mRNAs整个片段的降解，从而导致基因无法表达。 这种由miRNAs引起的mRNAs脱腺苷作用导致的基因表达受阻与阻碍mRNAs翻译成蛋白质不同，而且与研究人员表示这中作用与siRNAs（RNA干扰）通过完全互补得到的内切酶作用也不相同，这可能也就是miRNAs与siRNAs产生了on target和