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注I 注I㈣“?隈制胡的识别序列及切 剖形成的期性末墳均不相冋 基因工程综合题 1. （14分，每空2分）嗜热土壤芽胞杆菌产生的0-葡萄糖卄酶（BglB）是-?种耐热纤维素酶，为使其在 工业生产中更好地应用，开展了以下试验： I ?利用大肠杆菌表达Bg 1B酶 （1） PCR扩增bglB基丙时，选用 基因组DNA 作模板。 （2） 右图为质粒限制酶酶切图谱。bglB基因不含图中限制酶 识别序列。为使PCR扩增的bglB基因重组进该质粒,扩增的 bglB基因两端需分别引 入 和 不同限 制酶的识别序列。 （3）人肠杆菌不能降解纤维素.但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力.这是因 为 。 II.温度对BglB酶活性的影响 （4）据图1、2可知，80°C保温30分钟后，BglB酶会 :为高效利用BglB酶 降解纤维素，反应温度最好控制在 （单选）。 A. 50 °C 湼度兀 i? I温礙对BglBWf話性的够呜 B. 60 °C 120100806040200 冬ii:定￡丰 C. 70°C D. 80°C 2 20J 60 30o 图2 B0B阱的热葩宦性 注，隠的热稅定性是肿在?定漫度卜保逖一俊时何后通过英活性旳保持程度*反陕的 IIL利用分了育种技术提高BglB酶的热稳定性 在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳 定性高的BglB酶的基因。 （5）与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比，上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更 高，其原因是在PCR过程中 （多选）。 A.仅针对bglB基因进行诱变 B. bglB基因产生了定向突变 C. bglB基因可快速累积突变 D. bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 正希￥因(JAA1. （10分）周期性共济失调是一种由常染色体上的基因（用A或。表示）控制的遗传病，致病基因导致细 胞膜上正常钙离子通道蛋白结构异常，从而使正常钙离子通道的数量不足，造成细胞功能异常。该致病基 因纯合会导致胚胎致死。患者发病的分子机理如题8图所示.请回答： 正希￥因 (JAA ⑴图中①表示的生理过程是 ,如细胞 的 （填结构）被破坏，会直接影响图中 结构C的形成。 （3）—个患周期性共济失调的女性少正常男性（2） （3）—个患周期性共济失调的女性少正常男性 结婚生了一个既患该病又患红绿色肓的孩子（色肓基因用b代表）。这对夫妇中.妻子的基因型是 TOC \o 1-5 \h \z 这对夫妇再生一个只患一种病的孩子的概率是 。 TT. (10分)试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精，发育成胚胎后，再 移植回母体子宫内，以达到受孕目的的一种技术. 顺利受精必须满足两个条件：來自父方的精子要进行 .來自母方的卵母细胞要 。 (填生物技术)是培育试管婴儿最后一道工序。般来说，该技术操作比较合适的时期是 PCR技术可用于产前基因诊断，若消耗引物分子14个，则DNA扩增了 轮。 若用两种识別切割序列完全不同的限制酶E和F从基因组DNA上切卜?目的基因(1.2 kb),并将Z取代 质粒pZHZl(3.7 kb, 1 kb=1000对碱基)上相应的EF区域(0. 2 kb),形成重组质粒pZIIZ2,请据图 回答下列问题： 图 7-16-1 限制酶E和限制酶F在结构和功能上的不同Z处分别在于 TOC \o 1-5 \h \z ;② 。 pZHZ2所含有的碱基对数为 kbo 将重组质粒pZHZ2导入至山羊的受精卵细胞中，若pZHZ2进入细胞后插入在一条染色体DNA上，那么获 得转基因纯合子山羊的方式是 o 上述H的基因模板链屮的TGA序列对应一个密码子，翻译时识别该密码子的IRNA上相应的反密码子碱 基序列是 。 英国纽卡斯尔人学约翰?伯恩教授领导的研尤小组己从人的皮肤细胞中提取出细胞核，然后将其植入几 乎被完全剔除了遗传信息的牛卵细胞中，从而培育出人兽混合胚胎(如图所示)。该胚胎发育到第三天时 已含有32个细胞，研究人员希望它能继续生长到六天，再从胚胎中取出干细胞供医学研究使用。 混合胚胎的基因组成有99%以上都是人类的，只有不到1%是牛的，这1%的牛基因位于 。 核移植过程中用物理或化学方法如电脉冲、聚乙二醇等激活受体细胞，其冃的是使其完成 和发育进程。 ⑶从早期胚胎或原始性腺屮分离出來的细胞，称为ES或EK细胞，这类细胞在功能上的特点是 , 但把ES细胞培养在 细胞上能够维持不分化的状态。 如果想同时得到多头基因型相同的“重组动物”，可通过 技术得以实现，通过此技术所得到 的个体其繁怕方式为 。而试管动物技术首先要做的是 和早期胚胎的培养，试管动物和 克隆动物个体的获得最后一道工序均是