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遗传学实验日常要求 1. 课堂纪律 2. 课前预习,课间做好实验记录,课后详细总结实验结果并按时提交实验报告 3. 严格遵守实验室的各种规章制度 4. 维持实验台面、地面卫生,实验仪器有序、整洁 一、实验目的 1. 了解果蝇生活史中各个不同阶段的形态特点; 2. 区别雌雄果蝇以及几种常见突变类型的主要性状特征; 3. 掌握实验果蝇的饲养、管理及实验处理方法和技术 二、实验材料、用具及试剂 材料: 果蝇18﹟, 2﹟(vg) , 6﹟(w、sn3、m), 10﹟(e),14﹟(vg、e), 22﹟(w) 用具: 双目解剖镜、放大镜、小镊子、麻醉瓶、白瓷板、毛笔、乙醚、酒精棉球 试剂: 乙醚、琼脂粉、白糖、丙酸、酵母粉、玉米粉等.学生参与配置玉米粉培养基 三、实验内容 1. 果蝇的生活史 ?黑腹果蝇(Drosophila melanogaster) 果蝇作实验材料的优点 ?生活史短 ?繁殖率高 ?突变类型多 ?CS少, 唾腺CS 2. 形态构造 头部: 一对复眼,一对触角 胸部: 三对足,一对翅和一对平衡棒 腹部: 背面有黑色环纹,腹面有腹片,外生殖器在腹部末端,全身被体毛和刚毛 3. 成虫雌雄的鉴别 4. 果蝇常见的几种突变类型 四、实验步骤 1. 果蝇的饲养 (1) 培养基的配制 ?果蝇成虫的食物内需有醣类,而蛹期果蝇则可只依赖酵母即可生育。 配制方法 水分成两份:一份用于溶解琼脂和糖,另一份煮玉米粉,待两份分别溶解煮好后再合到一起煮沸,灭火后加入丙酸;充分搅拌后再分装培养瓶 待培养基冷却后,在其表面洒稍许酵母粉,插一灭菌的滤纸片作为幼虫化蛹的干燥场所 培养瓶的灭菌 2)果蝇继代培养 果蝇转移到新配制的培养基中繁殖.转移时要注意,不要使果蝇从两个瓶口的接缝处飞出.一般用黑纸包住带有亲本果蝇的培养瓶,使其飞入新培养瓶内 幼虫化蛹时爬到瓶璧或滤纸上 2. 果蝇性状的观察 1) 果蝇的麻醉处理 ?准备一只与培养瓶口径相同的空瓶作为麻醉瓶,并配以脱脂棉塞 ?去掉培养瓶棉塞,立即与麻醉瓶口相对,培养瓶在上,一手稳住两瓶,另一手轻轻震拍培养瓶,使果蝇落入麻醉瓶中 果蝇的麻醉 转入麻醉瓶中观察结果 腹部体节数目:雌果蝇6节,腹部底部为产卵管,呈现圆锥状凸出。 腹部体节数目:雄果蝇4节,腹部底部为交尾器,呈现黑色圆形外观。 观察后的结果填入下表 注意事项 ?配制培养基时要将玉米粉及琼脂分开煮 ?转移果蝇时要防止果蝇飞走 ?麻醉果蝇时要掌握麻醉尺度,需要用活体时,不可以麻醉过度使果蝇致死;实验后不用的果蝇要及时处死,不可放飞 五、作业 1. 绘制雄性果蝇性梳示意图. 2. 如何区分成蝇的雌雄个体? 3. 果蝇作为遗传学模式材料的优点有哪些? 本次实验内容 1. 生活史观察 2. 果蝇的麻醉 3. 雌雄果蝇的辨别 4. 突变性状的观察 2)果蝇♀♂识别 ? ♀ ♂ 体形 大 小 腹纹 5 3 腹部末端 尖 圆 性梳 无 有 果蝇♀♂识别 果蝇♀♂识别 果蝇性状观察 3、眼睛的颜色 2、翅的大小 1、身体的颜色 vg w、m e w w m w m w、m、sn b e e+ 卷毛 正常(+) 正常(+) 正常(+) 正常(+) 刚毛 小翅 正常(+) 残翅(vg) 小翅(m) 正常(+) 翅形 白色 红色(+) 红色(+) 白色(w) 白色(w) 眼色 正常 黑色(e) 正常(+) 正常(+) 黑色(b) 体色 w m sn 黑檀体 残翅红眼 小翅白眼 黑身白眼 类型特征 * * * * * 遗传学实验 实验一、果蝇的性状、生活史观察及饲养(3学时) 果蝇的生活周期长短与温度有关. 30℃以上果蝇不育和死亡,低温则使它的生活周期延长,生活力降低;最适温度为20-25℃ 4.2 d 6.3 d 18 d 57 d 幼虫?成虫 5 d 8 d 卵?幼虫 25℃ 20℃ 15℃ 10℃ ?25℃时,从卵到成虫约10d,成虫约活15d ?完全变态 ?半天交尾, 1d产卵 ?1-2d孵化 ?3d,两次蜕皮 ?2-3d化蛹 ?4d羽化 卵:长0.5 mm,椭圆形,腹面稍扁平,被绒毛膜,在背面的前端伸出一对触丝,使卵附着在食物(或瓶壁)上 幼虫: 三龄幼虫长4-5mm,头部稍尖,黑斑为口器;其后有一对透明的唾液腺;一对生殖腺位于躯体后半部上方,精巢较大,似明显的黑点,而卵巢则较小,可以此作为鉴别.幼虫活动力强而贪食,爬行时留下很多条沟,沟多而且宽时,表明幼虫生长良好. 蛹: 化蛹前从培养基爬出,附着在瓶壁上,形成一梭形的蛹.起初蛹壳颜色淡黄而柔软,以后逐渐硬化,变为深褐色,即将羽化 成虫: 刚羽化的虫体较长,翅膀尚未展开,体表未完全几丁质化,呈半透明的乳白色;透过腹部体壁,可见
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