动物细胞融合和单克隆抗体.docVIP

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PAGE PAGE 4 2.2.2 单克隆抗体 导学案 班级 姓名 问题生成阶段【温故知新】 问题生成阶段 【温故知新】 免疫 免疫 1.抗体的化学本质是 ,是由 分泌的,能和抗原 结合。 2.动物细胞融合:不同DNA的两种细胞 诱导 融合细胞 筛选 杂交细胞 3.动物细胞培养:分散的单个细胞 制成 原代培养 培养 【新知预学】 1.传统抗体的获得 (1)方法:①向动物体内反复注射某种 ,使动物产生 ;②从动物 中分离所需抗体。 (2)特点: 、纯度低、 。 2.单克隆抗体的制备原理 细胞 特点 B淋巴细胞 能产生 ,但不能 骨髓瘤细胞 能 ,但不能 融合细胞 既能 ,又能 3.单克隆抗体的制备过程 (1)制备产生特异性抗体的B淋巴细胞:向免疫小鼠体内注射特定的 ,然后从小鼠 获得相应的B淋巴细胞。 (2)细胞融合:融合的方法常用聚乙二醇、 、电激等,这时得到的融合细胞除了杂交瘤细胞,还有 相互融合的细胞和 相互融合的细胞。 (3)筛选:用特定的 培养基筛选出杂交瘤细胞。这时候的杂交瘤细胞既能 同时又能 。 (4)克隆化培养和抗体检测:从杂交瘤细胞群中选出能产生 的特异性杂交瘤细胞。 相关资料:先在多孔培养皿上培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养,然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。由于该细胞群是由单个杂交瘤细胞克隆来的,所以产生的抗体一定是化学性质单一、特异性强的单克隆抗体。 (5)培养杂交瘤细胞获得单克隆抗体:将杂交瘤细胞在 条件下做大规模培养或注射到小鼠 内增殖,从 ______或小鼠的 ______ 中提取单克隆抗体。 4.由上述抗体的产生过程我们可将单克隆抗体的定义归纳为:由 大量繁殖所产生的 、 的抗体。 5.单克隆抗体的应用 (1)优点: 、 、并可能大量制备。 (2)应用 ①作为诊断试剂,具有准确、 、简易、 的优点。 ②用于 和 。 问题解决 问题解决阶段 【合作探究】单克隆抗体的制备 1.如何得到已免疫的B淋巴细胞? 2.如何诱导效应B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合? 3.融合过程中会出现几种类型的细胞? 4.上述过程得到的细胞哪种是我们需要的?其特点是什么? 怎样淘汰我们不需要的细胞? 5.淘汰后的细胞所产抗体是单一的吗?如何检测? 6.如何获得大量“单克隆抗体”? 注意:制备单克隆抗体过程中两次筛选的方法及目的 项目 第一次筛选 第二次筛选 筛选 原因 诱导融合后得到多种 细胞,另外还有未 的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞 筛选 方法 用特定的选择性培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(“BB”细胞、“瘤瘤”细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(“B瘤”细胞)才能生长 用多孔培养板培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群 筛选 目的 得到 细胞 得到能分泌所需 的 杂交瘤细胞 【巩固探究】 请用箭头把以下代表单克隆抗体制备过程的图解字母按正确顺序连接起来。 联系前后知识 学会举一反三 联系前后知识 学会举一反三 问题拓展阶段 1.由单克隆抗体研制而成的“生物导弹”由两部分组成,一是“瞄准装置”,二是杀伤性“弹头”,下列对此描

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