实验7标本中未知细菌的分离和鉴定.ppt

实验十 标本中未知细菌的分离和鉴定 致病菌的检验程序和常用项目 药物敏感试验 直接涂片 染色镜检 分离培养 形态特征 生化试验 血清学试验 动物实验 明确诊断 初步诊断 血清学诊断 细菌的快速鉴定 形态学检查 （常规培养或 特殊培养） （沉淀反应、凝集试验、免疫标记技术等） (微生物数字编码分类鉴定法、血培养自动化检测系统、核酸杂交技术、PCR技术、DNA芯片技术等） 一、标本中未知病原性球菌的分离和鉴定 （一）实验目的 1、掌握脓汁标本中常见病原菌分离和鉴定方法 2、掌握药物敏感试验 （二）实验器材 1、待检的脓汁标本； 2、培养基：血琼脂平板，生化反应管；普通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸片，3%过氧化氢； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养箱、显微镜、载玻片等 直接涂片染色镜检：观察细菌形态、排列、染色性 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板 涂片、染色、镜检 挑取可疑菌落 生化反应测定 纯培养 致病性测定 （凝固酶、耐热核酸酶） 标本 血液 脑脊液 肉汤增菌培养 涂片染色镜检 （三）实验方法与检验流程 脓拭子 分离培养 （血平板） 直接涂片 革兰染色 革兰染色 触酶试验 甘露醇试验 药敏试验 纯培养 （三）实验方法与检验流程 生化反应 革兰染色的操作步骤 涂片制作 染 色 镜 检 革兰染色的操作步骤 初染 媒染 脱色 复染 结晶紫1分钟 卢戈氏碘液1分钟 95%酒精30秒 稀释复红30秒 （+） （—） 甘露醇发酵试验 1.触酶试验：区别葡萄球菌与链球菌； 2.甘露醇分解试验：区别葡萄球菌的致病菌株与非致病菌，致病菌分解甘露醇产酸,使培养基由紫色变黄色. (-) (+) 脓汁标本的生化反应 二、标本中未知肠道感染细菌的分离和鉴定 （一）实验目的 1、掌握肠道杆菌分离和鉴定的一般步骤 2、熟悉肠道杆菌鉴定生化反应和血清学反应 （二）实验器材 1、待检的粪便标本； 2、培养基：SS平板，生化反应管；普通琼脂平板； 3、试剂：革兰染色液，生理盐水；药敏纸片；沙门菌、志贺菌多价诊断血清； 4、其它：接种环、接种针、酒精灯、培养箱、显微镜、载玻片等。 药敏试验 粪便标本 SS平板 克氏双糖铁斜面培养基 生化反应管 观察结果 玻片凝集试验 （三）实验方法与检验流程 纯培养 革兰染色 肠道杆菌五管糖试验 菌名 葡萄糖 乳糖 麦芽糖 甘乳糖 蔗糖 大肠埃希菌 ⊕ ⊕ ＋ ＋ ＋/ － 志贺菌 ＋ － ＋/ － ＋ － 沙门菌 ＋ － ＋ ＋ － 变形杆菌 ⊕ － ＋/ － － ＋/－ 肠道杆菌的血清学试验（玻片凝集试验） 材料 1. 菌种：伤寒杆菌培养物、痢疾杆菌培养物 2. 伤寒杆菌的诊断血清，志贺菌诊断血清、载玻片、生理盐水 方法 血清 生理盐水 肠道杆菌生化反应的结果 葡萄糖 乳糖 动力 H2S 尿素 ? ? ⊕ ⊕ ± － － 埃希菌属 非致病菌 ⊕ ＋ － － － 克雷伯菌属 ⊕ ± ＋ ＋ ＋ 变形杆菌 ⊕ － ＋ ＋ － 乙型副伤寒 致病菌 ⊕ － ＋ ± － 甲型副伤寒 ＋ － ＋ ＋ － 伤寒杆菌 ＋ － － － － 痢疾杆菌 人有了知识，就会具备各种分析能力， 明辨是非的能力。 所以我们要勤恳读书，广泛阅读， 古人说“书中自有黄金屋。 ”通过阅读科技书籍，我们能丰富知识， 培养逻辑思维能力； 通过阅读文学作品，我们能提高文学鉴赏水平， 培养文学情趣； 通过阅读报刊，我们能增长见识，扩大自己的知识面。 有许多书籍还能培养我们的道德情操， 给我们巨大的精神力量， 鼓舞我们前进。 * *