细胞培养技术应用重点.ppt

鱼用疫苗免疫效果评价 1、非特异性免疫评价指标 2、特异性免疫评价指标 3、相对免疫保护率 鱼用疫苗免疫效果评价 1、非特异性免疫评价指标 2、特异性免疫评价指标 3、相对免疫保护率 利用体液免疫来评价鱼类疫苗免疫效果。诸多研究结果证实了血清抗体效价具有反映机体免疫应答的能力。鱼体接种疫苗后，血清抗体效价升高，提示受免鱼类获得了较好的免疫保护效果。 鱼用疫苗免疫效果评价 1、非特异性免疫评价指标 2、特异性免疫评价指标 3、相对免疫保护率 主要组织相容性复合体基因表达量变化：主要组织相容性复合体是获得性免疫的核心成分，其编码的蛋白位于细胞表面，可以将抗原物质呈递给T 淋巴细胞。 鱼用疫苗免疫效果评价 1、非特异性免疫评价指标 2、特异性免疫评价指标 3、相对免疫保护率 在免疫试验后进行攻毒试验，统计免疫组和对照组的死亡率，最后计算相对免疫保护率，相对免疫保护率= ( 1－免疫组死亡率/对照组死亡率) ×100%。 * * * * * * * * * * * * * 什么是疫苗？ 疫苗是将病原微生物如细菌、病毒等及其代谢产物，经过人工减毒、灭活或转基因等方法制成的用于预防传染病的自动免疫制剂。 疫苗刺激机体免疫系统对某种病原微生物处于高度戒备状态 疫苗的发展历史 ①古典疫苗时期：牛痘苗、狂犬病疫苗 ②培养疫苗时期：脊髓灰质炎疫苗、卡介苗 ③基因工程疫苗时期：乙型肝炎基因工程疫苗 疫苗的种类 灭活疫苗 弱毒疫苗 基因工程疫苗 重组亚单位疫苗 DNA疫苗 基因缺失疫苗 基因突变疫苗 活载体疫苗 传统疫苗 成本低、无致病性、适用广 灭活疫苗（inactivated vaccine）：又称死疫苗，是用化学或物理的方法，将具有感染性的完整的病原微生物杀死，使其失去传染性而保留抗原性而成。 一、灭活疫苗 百日咳、乙型脑炎、流行性脑脊髓膜炎、狂犬病、伤寒、钩体病、甲型肝炎、鼠疫、流感、脊髓灰质炎等疫苗。 二、减毒活疫苗（弱毒疫苗） 减毒活疫苗（live-attenuated vaccine）：用人工诱变或从自然界筛选出的毒力高度降低或无毒的活的病原微生物制成的疫苗。可模拟自然发生隐性感染，诱发理想的免疫应答而又不产生临床症状。 脊髓灰质炎、结核病、麻疹、风疹疫苗、腮腺炎等疫苗。 ● 优点：能诱发全面、稳定、持久的体液、细胞和粘膜免疫应答；一般只须接种一次；可采用口服、喷鼻或气雾途径免疫。 ● 缺点：有效期短和热稳定性差，运输、保存条件要求较高；回复突变危险；使用范围相对窄。 减毒活疫苗优缺点 1、基因缺失活疫苗（gene deleted live vaccine）：采用分子生物学技术，去除与毒力或毒力相关基因片段，使病原微生物毒力减低或丧失。用缺失突变毒株制成的疫苗。 与自然突变株（多为点突变毒株）相比，基因缺失活疫苗具有突变性状明确、稳定、不易发生毒力返祖的优点。 三、基因工程疫苗 对于某些抗原性弱、易发生免疫逃避的病原体，常规疫苗往往难以获得有效的免疫应答及保护性。 2、亚单位疫苗 对于一些免疫保护机制不清、可能诱导免疫病理反应、有潜在致肿瘤作用的病毒，以及不易培养的病原体，则难以用传统方法生产疫苗。 亚单位疫苗：亚单位疫苗是应用某些化学试剂裂解细菌或病毒,驱除病原微生物中有害成分和无用的成分,保留其中一种或几种主要抗原成分的一类疫苗。不含病原体核酸，选用能诱发宿主产生中和抗体的微生物蛋白或表面抗原而制成。 ● 白喉类毒素、破伤风类毒素 ● 流感嗜血杆菌荚膜多糖、脑膜炎球菌荚膜多糖 ● 流感病毒血凝素和神经氨酸酶 ● 人乳头瘤病毒 优点：除去了病原体中与诱发保护性免疫无关或有害成分，只保留有效的免疫原成分，因而免疫作用明显增强而稳定，可靠性提高，对机体引起的不良反应小。 缺点：需要选用佐剂；不能诱发细胞免疫和黏膜免疫。 将病原体中能诱导保护性免疫应答的目的抗原编码基因克隆后，插入适当的原核或真核表达载体质粒； 再将重组质粒导入细菌、酵母菌或哺乳动物细胞中高效表达目的基因； 分离、提取、纯化目的蛋白而制成。 基因重组亚单位疫苗 (genetic engineering subunit vaccine) 活载体疫苗：又称重组载体疫苗，是将有效的目的抗原的编码基因导入活载体（无或弱毒的细菌或病毒株）中，构建重组菌株；目的基因可