细胞骨架研究Cytoskeleton.ppt

核纤层蛋白及核纤层蛋白网络 核纤层蛋白的骨架作用 核纤层蛋白位于内核膜的下方, 它不仅是核膜下的骨架, 对于维持细胞核的形态和核重建具有重要作用, 同时也为染色质提供锚定位点 细胞骨架体系 细胞骨架 细胞外基质 细胞膜骨架 细胞质骨架 细胞核骨架 胶原 非胶原糖蛋白 氨基聚糖和蛋白聚糖 弹性蛋白 纤丝 微管 微丝 中间丝 粗丝 核基质 核纤层·核孔复合体体系 染色体骨架 作为支架(scaffold)： 为维持细胞的形态提供支持结构，如红细胞质膜膜骨架结构维持； 在细胞内形成一个框架(framework)结构： 为细胞内的各种细胞器提供附着位点。细胞骨架是胞质溶胶的组织者，将细胞内的各种细胞器 组成各种不同的体系和区域的网络结构； 为细胞器的运动和细胞内物质运输提供机械支持： 细胞骨架作为细胞内物质运输的轨道；在有丝分裂和减数分裂过程中染色体向两极移动，以及 含有神经细胞产生的神经递质的小泡向神经细胞末端的运输都要依靠细胞骨架的机械支持； 为细胞从一个位置向另一位置移动： 一些细支撑提供胞的运动, 如伪足的形成也是由细胞骨架提供机械支持。纤毛和鞭毛等运动器官主要是由细胞骨架构成的； 为信使RNA提供锚定位点，促进mRNA翻译成多肽： 用非离子去垢剂提取细胞成分可发现细胞骨架相当完整，许多与蛋白质合成有关的成分同不被 去垢剂溶解的细胞骨架结合在一起； 参与细胞的信号传导： 有些细胞骨架成分常同细胞质膜的内表面接触，这对于细胞外环境中的信号在细胞内的传导起 重要作用； 是细胞分裂的机器： 有丝分裂的两个主要事件, 核分裂和胞质分裂都与细胞骨架有关。 细胞骨架的功能 微绒毛(microvilli) 是一些动物细胞表面的指状突起。微绒毛的长度为1～3μm，直径为0.1μm,由几十个成束平行排列的肌动蛋白纤维支持并定向。微绒毛中肌动蛋白纤维的排列方向相同，(+)端指向微绒毛的尖端。 一个肠细胞表面有几千个微绒毛, 它们的存在大大增加了肠上皮表面面积, 有利于吸收营养物质。 肌钙蛋白 Kinesin-dept.transport: conyeys Mit(by KIF),Lys,Mv?ER or periphery.Cytosolic dynein-dept transport: conyeys elements of ER,late endosome, Lys?cell center 内膜系统中通过小泡进行的蛋白质运输, 都是以微管作为轨道的。将细胞质中以微管为轨道运输的发动机蛋白和它们运输的关系。 微管发动机蛋白的功能分类 类别 运输物 运输方向 细胞质驱动蛋白 胞质溶胶小泡 (+) 纺锤体驱动蛋白 纺锤体和星微管, 中心粒、动粒 (+)或(-) 细胞质动力蛋白 在有丝分裂和减数分裂期运输胞质溶胶小泡,动粒 (-) 轴丝动力蛋白 纤毛和鞭毛中单管 (-) 细胞质动力蛋白的运输方式：它在细胞中至少有两个功能∶第一是有丝分裂中染色体运动的力的来源；第二是作为负端微管走向的发动机，担负小泡和各种膜结合细胞器的运输任务。细胞质动力蛋白在微管上移动的方向与驱动蛋白相反，从正端移向负端。 驱动蛋白(kinesins)的结构和功能 ● 运输方向 体外实验证明驱动蛋白的运输具有方向性，从微管的(-)端移向微管的(+)端，驱动蛋白是正端走向的微管发动机(plus end-directed microtublar motor)。由于神经轴中所有的微管都是正端朝向轴突的末端，而负端朝向细胞体，所以驱动蛋白在神经细胞中负责正向的运输任务。 ● 运输速度 驱动蛋白沿一条原纤维运输，移动的速度与ATP的浓度有关，速度高时，可达到每秒900nm。驱动蛋白每跨一步的长度为8nm,正好是一个αβ微管二聚体的长度, 每跨一步所消耗的力是6pN。因此可以推测，驱动蛋白一次在微管轨道上移动两个球形亚基。 细胞中微管介导的物质运输 核基质 (a)在有去垢剂和2M盐存在下分离的细胞核电镜照片, 只剩下由DNA环包围的核基质。箭头所指是DNA环的最外限； (b)小鼠成纤维细胞的核基质, 首先用去垢剂、高盐提取, 然后用核酸酶和低盐处理除去染色质镶嵌DNA。可见由残存的纤维状基质构成的细胞核(N), 和细胞骨架基质构成的细胞质(C)区。 细胞骨架的研究方法 荧光显微镜在细胞骨架研究中的应用 电视显微镜(video microscopy) 电子显微技术的应用 相同细胞中微管、微丝和中间纤维的荧光定位 三种不同荧光染料探针同相应的蛋白纤维结合从而