生物学系统实验(3)介绍及实验安排.pptVIP

液体菌种活化培养基（种子培养基） 可以利用微生物实验书的淀粉培养基，注意调节pH值； 也可以利用发酵培养基（豆粕粉需要煮水后使用）； 发酵培养基 可溶性淀粉 8g； 豆粕粉 4g； Na2HPO4 .12H2O 0.8g； （NH4）2SO4 0.4g； CaCl2 0.2g NH4Cl 0.15g； 水100ml 121.3℃灭菌20分钟 如果还想使用自已组的设计培养基，可以以上述培养基作为对照（不一定所有菌株都做，选择好的） 培养 接种需发酵测定的菌种活化培养液，1mL/瓶（接种量2-5%，实验前后统一）。 37 ℃，摇瓶振荡培养2-3天。 α-淀粉酶酶活力测定的原理 底物（反应物）为淀粉 产物为麦芽糖、糊精等 酶活力测定（碘比色法——目视） 酶活力定义：在60℃下1小时内将1克淀粉转化为糊精的酶量称一个酶活力单位（5~10分钟反应完成）。 淀粉及糊精检测原理：碘检测 淀粉（紫蓝色，30分子以上）→红色糊精（红棕色，7-30分子）→无色糊精，7分子以下）→麦芽糖（不显色）→葡萄糖（不显色） 计算公式： 酶活力测定步骤 发酵液（酶液） 2%淀粉液20mL+5mLpH6.0缓冲液 预热5min（60℃） 预热5min（60℃） 吸取0.5mL 混匀、计时（保温60℃），反应开始 在白瓷板上定时取样（1滴）比色 比色终点，计下反应时间（与标