体外抗原抗体反应概述讲义.ppt

体外抗原抗体反应概述;抗原抗体反应：是指抗原与相应抗体的特异性结合反应;第一节 抗原抗体反应的原理; 抗原抗体结合反应是抗原决定簇和抗体分子超变区之间的相互作用，是一种分子表面的特异的可逆的弱结合力（只能在极短距离内才能发生效应）。 抗原抗体结合反应的条件： ①抗原与抗体间的特定部位的空间结构必须相互吻合，具有互补性（先决条件）; ②抗原决定簇与抗体超变区必须紧密接触，才能有足够的结合力，使抗原抗体分子结合在一起。 ;;1、静电引力; 二、范德华引力; 概念：供氢体上的氢原子与受氢体原子间的引力。 ;四、疏水作用力（疏水键）;静电引力：异性相吸 （electrostatic forces） 范德华引力:作用最小 （van der Waals interactions） 氢键:最具特异性 （hydrogen bond ） 疏水作用力:作用最大 （hydrophobic interactions） ;; 结合力的大小;;亲和常数（K）：;;;;;2、决定因素： 由抗原决定簇和抗体分子超变区之间空间结构的互补性决定的。;概念：两种不同的抗原分子具有部分相同或类似结构的抗原表位，可与彼此相应的抗血清发生反应。;三、比例性（proportionality）;网格学说（图）; Ab/Ag过剩 过剩方的结合价得不到饱和，大多数游离存在，只形成小分子复合物（不可见）。;最适比(optimal ratio)：是指形成沉淀物最多，上清液清晰，几乎无游离抗原或抗体的抗原抗体浓度比。 等价带(equivalencezone)：形成沉淀物最多的抗原与抗体分子比例合适的范围。 带现象：在等价带前后，由于抗体和抗原过量，形成的沉淀物少，上清液中可测出游离的抗体或抗原的现象。 前带(prozone)抗体过量时称为。 后代(postzone）抗原过量时称为。;在抗原抗体反应中，抗体（或抗原）与一定量的对应物结合出现可见反应所需的最小量称为效价（或滴度），一般以最高稀释倍数表示，正好是稀释度的倒数。; 三、可逆性（reversibility);4、决定抗原抗体解离的因素;四、阶段性;第三节 抗原抗体反应影响因素;抗体是血清学反应中的关键因素，对反应的影响表现在以下三个方面: (1)来源:来自不同动物的免疫血清，其反应性有差异。家兔等大多数动物的免疫血清具有较宽的等价带，通常在抗原过量时才易出现可溶性免疫复合物;马等大动物和人的免疫血清等价带较窄，少量的抗原或抗体过剩，均可形成可溶性免疫复合物.;(2)特异性与亲和力:;（3）浓度: 抗体的浓度往往是与抗原相对而言。合适的浓度才出现明显的反应现象。因此许多试验应进行抗体预滴定，找出最适反应浓度。 ;电解质: 生理盐水或缓冲液 酸碱度: pH6～pH8 温 度: 15℃～40℃，37℃最适 ;（一）电解质 ; 通常在血清学试验中，以8.5g/LNaCl溶液作为抗原抗体的稀释液及反应液，其中Na+和Cl-可分别中和胶体颗粒上的电荷，使胶体颗粒的电势下降，形成可见的沉淀物或凝集物。但如果电解质浓度过高，则会出现非特异性蛋白质沉淀，即盐析。 补体参与的溶细胞反应，除需要等渗的NaCl溶液外，还需适虽的Mg2+和Ca2+离子参与。 ;;;; 表