10130364邱嘉辉抗体工程翻译.docxVIP

华东理工大学2014—2015学年第2学期 《抗体工程》考核要求 2015.5 班级__生工131__学号______ 姓名____邱嘉辉_____ 开课学院 生工学院 任课教师 蔡孟浩 成绩__________ 论文题目： 论文要求： 本课程为选修考查课，考试以特别作业的形式进行： 查找1篇近5年内与抗体药物、抗体新应用、抗体工程新方法相关的英文文献，结合课堂讲授内容进行阅读和翻译。 格式要求详见《抗体工程》课程论文规范与要求。 教师评语： 教师签字： 年 月 日 一种针对分泌的促肿瘤转移蛋白（AGR2）的人源化单克隆抗体可以有效地抑制肿瘤生长 摘 要：促肿瘤转移蛋白（AGR2）是一个潜在的肿瘤抗体目标蛋白,并且我们之前报道了一个与促肿瘤转移蛋白（AGR2）特异性结合的鼠类抗体18A4。然而，其人源化是一个在临床使用之前进行免疫原性试验是一个必须克服的困难，此外对哺乳动物表达系统中载体的优化也是在接下来的工业化生产中必要的工作。在本文中，我们描述了一种可以阻止分泌型的促肿瘤转移蛋白活性的抗肿瘤人类抗体。我们应用改型抗体技术和去免疫原性化分析来建立18A4的人源性抗体的改型。将其通过物理和化学性质的表现进行比较，发现可以将18A4HuⅠ型作为最佳的人源化的候选物，鼠类异种移植物的研究也表明18A4HuⅠ型抗体可以有效地抑制的异种移植物肿瘤的生长，使用AGR2变体进行的抗体阻遏抗原决定簇分析也表明18A4Hu Ⅰ型抗体的抑制作用的活性是通过阻遏AGR2上依赖于E60-H76 和A86-E153上的氨基酸位点的功能基团来表现出来的。除此之外，在本篇报道中，我们也一个pHAb-FAST的载体系统，这种载体系统特意为人源化抗体哺乳动物表达载体快速构建所设计而成的，通过pHAb-FAST载体表达系统，18A4HuⅠ型表达载体可以仅通过两次重叠聚合酶链反应被迅速地构建起来，据我们所知，针对于促肿瘤转移蛋白（AGR2）的18A4HuⅠ型抗体是一个有希望作为人源性的抗肿瘤药物的候选，并且pHAb-FAST表达系统是一个有效的优化过的哺乳动物细胞表达载体构建的工具。我们的研究能够加速以抗体为基础的癌症治疗的发展。 1介绍 癌症是一个主要的健康问题，也是世界范围上人类死亡的一个主要原因。数十年的研究和发展已经使得在抗肿瘤治疗方面有了显著的进步。在这些治疗手段之中，靶点治疗已经被广泛应用于临床治疗中，同时也与其他的经典抗癌症治疗手段相结合，这些手段包括外科手术、放射性治疗和化学药物疗法。单克隆抗体已经通过?针对原癌基因人类表皮生长因子受体（HER2）来治疗乳腺癌的药物曲妥单抗的成功研发的而在临床上被证明是靶点治疗中最重要的组成部分。直至今日，二十种以抗体为基础的针对不同癌症的治疗手段已经被批准生产并且还有很多种单克隆抗体候选药物已经处于临床试验阶段。然而，只有十一种不同的靶点药物是被覆盖到上述二十种的抗肿瘤抗体中，某种特定的癌症是一个极度复杂和多种性质的疾病，针对新的靶点的抗体急需要被开发出来。 促肿瘤转移蛋白（AGR2）会在不同种的人类癌症中过度表达，特别是在腺癌中。由于其含有胞外信号多肽和内质网停留序列KTEL，促肿瘤转移蛋白（AGR2）在胞内和胞外空间中都有分布，人类癌症中促肿瘤转移蛋白（AGR2）上的功能基团已经被广泛地研究了。这些功能基团会促进肿瘤的转换，肿瘤细胞的粘合，增殖，转移，生存，药物抗性并且会有蛋白质二硫化物异构酶（PDI）活性。除此之外，分泌型的促肿瘤转移蛋白（AGR2）根据报道会存在于患者的尿液和血清当中，这表明促肿瘤转移蛋白（AGR2）是在癌症治疗抗体能够结合的靶点蛋白。 此前，我们已经生产了一个促肿瘤转移蛋白（AGR2）鼠科的单克隆抗体18A4并且确认了它的特异性。然而，鼠类抗体是不能被用于临床治疗当中的，因为人体当中存在强力的人类抗鼠抗体（HAMA）的免疫反应。抗鼠免疫反应（HAMA）不仅会导致免疫介导的不利作用而且会导致迅速的抗体体内清除，这种清除反应会引起不良的受应活性。因此，在精确地探索这种抗体蛋白的抗肿瘤活性并指导详细的预临床和临床研究之前，对于这个以促肿瘤转移蛋白（AGR2）为靶点蛋白的单克隆抗体进行人源化是必要的。目前，几种人源化技术都是可用的，包括互补决定簇改型（CDR），特异性决定残基（SDR）改型，抗体表面重塑和去免疫原性。怎么合适地选择和将这些技术结合起来在人源化过程中是需要被关注的。 2材料和方法 2.1抗体，试剂，老鼠和动物研究许可 鼠类的抗促肿瘤转移蛋白（AGR2）的单克隆抗体18A4通过研究