SDSPAGE蛋白凝胶电泳.pptVIP

思考题 在不连续体系SDS中,当分离胶加完后,需在其上加一层水,为什么? 电极缓冲液中甘氨酸的作用? 在不连续体系SDS中,分离胶与浓缩胶中均含有TEMED和AP,试述其作用? 样品液为何在加样前需在沸水中加热几分钟? 97 66 44 29 20 14 Marker Tanon-1600数码凝胶图像分析系统 GIS 1D 图像分析软件(Ver. 4.00) 诱导前后蛋白表达差异 IPTG诱导表达His-GFP融和蛋白（31.9kD）。 1为诱导前，2～6分别为诱导0.5, 1, 1.5, 2, 2.5hrs。 电泳过程中的不正常现象 1 “微笑”现象 指示剂前沿呈现两边向上的曲线形，主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致，多出现于较厚的凝胶中。 处理办法：待其充分凝固再作后续实验。 2 皱眉现象 由于垂直电泳槽的装置不合适引起的，特别是当明胶和玻璃板组成的“三明治底部有气泡”或靠近隔片的凝胶聚合不完全 处理办法：可在两板间加入适量缓冲液，以排除气泡。 3 “拖尾”现象 样品溶解不佳引起或分离胶浓度过大 解决办法： 加样前离心 选择合适的样品缓冲液和凝胶缓冲液 加增溶试剂 降低凝胶浓度 4 “纹理”现象 样品中的不溶性颗粒引起的 解决办法： 增加溶解度 离心除去不溶性颗粒 5 偏斜现象 电极放置不平行或加样位置偏斜引起 6-2 整块胶分离的条带太宽 主要是未浓缩好