2015-2016学年高二生物人教版选修3课件：专题1 1.2 基因工程的基本操作程序.pptxVIP

1.2　基因工程的基本操作程序;;预习导学 挑战自我，点点落实;2.目的基因的获取 (1)目的基因 主要是指 的基因，也可以是一些具有 的 因子。 (2)常见方法 ①从基因文库中获取 基因文库的种类;②利用PCR技术扩增目的基因 a．原理： 。 b．条件： 、DNA模板、 、四种脱氧核苷酸。 c．过程：目的基因DNA受热变性后解链为单链， 与单链相应互补序列结合，然后在 作用下进行延伸，如此重复循环多次。 d．结果：每一次循环后，目的基因的量可以 ，??成指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)。;③人工合成法：如果基因比较小， 又已知，可借助 用化学方法直接人工合成。;二、基因表达载体的构建(阅读P11);3.基因表达载体的构建过程 一般用同一种 酶分别切割载体和目的基因，再用 酶把两者连接。;三、将目的基因导入受体细胞(阅读P11－13);(2)导入动物细胞 ①方法： 技术。 ②常用受体细胞： 。 (3)导入微生物细胞 第一步：首先用 处理细胞，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，这种细胞称为 细胞。 第二步：将 溶于缓冲液中与 细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收 ，完成转化 过程。;四、目的基因的检测与鉴定(阅读P13－15);2.个体水平鉴定 包括抗虫、抗病的 实验，以确定是否有抗性及抗性程度。基因工程产品需要与天然产品活性进行比较等。;;;一、目的基因的获取;过 程;优点;2.PCR技术与DNA复制的比较;联系;;3.PCR过程中需要解旋酶吗？所需要的DNA聚合酶应具有什么特点？ 答案　PCR过程中，DNA双链解开是在高温下完成的，不需要解旋酶；由于PCR过程温度较高，所以需要能耐高温的DNA聚合酶。 4.什么样的基因适合用DNA合成仪直接人工合成？ 答案　基因比较小，核苷酸序列又已知。 ;;问题导析 (1)PCR利用的是 原理，将双链DNA之间的 打开，变成 DNA，作为聚合反应的模板。 (2) 则是以目的基因转录成的信使RNA为模板，在逆转录酶的作用下，先反转录形成互补的单链DNA，再合成双链的DNA。 则均不需要模板。 答案　D;一题多变 判断正误： (1)目的基因可以从自然界已有物种直接分离，也可人工合成。(　　) (2)目的基因就是指编码蛋白质的基因。(　　) (3)真核生物的基因中含有内含子，因此常用反转录法获取目的基因。(　　) (4)利用DNA合成仪可以在短时间内大量扩增目的基因。(　　);二、基因表达载体的构建与转化;特别提醒：该过程把三种工具(两种工具酶、一种载体)全用上了，是最核心、最关键的一步，在体外进行。;2.将目的基因导入受体细胞的方法比较;植物细胞;微生物细胞;归纳提炼　;;3.为什么动物的体细胞一般不作为受体细胞？ 答案　动物体细胞全能性受到限制，不能发育为一个新个体。 4.为什么微生物细胞适合作为基因工程的受体细胞？但若通过基因工程生产人的糖蛋白，从细胞器的功能分析是否可用大肠杆菌作为受体细胞呢？ 答案　微生物细胞具有繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少的优点。不可以，糖蛋白上的糖链是在内质网和高尔基体上加工完成的，而内质网和高尔基体存在于真核细胞中，大肠杆菌是原核生物，细胞中不含有这两种细胞器。;5.用于构建基因表达载体的质粒为什么必须具有启动子和终止子？启动子和终止子与起始密码和终止密码是一回事吗？ 答案　导入到受体细胞的目的基因的表达需要调控序列，因此在插入目的基因的部位之前需有启动子，之后需有终止子。不是一回事，启动子和终止子都在DNA上，在遗传信息转录时起作用。启动子是启动转录的开始，终止子是DNA分子上决定转录停止的一段DNA序列，其组成单位都是脱氧核苷酸。而起始密码子和终止密码子都是mRNA上三个相邻碱基。起始密码子决定翻译的开始，终止密码子决定翻译的停止。;;(1)一般情况下农杆菌不能感染的植物是__________，利用农杆菌自然条件下感染植物的特点，能实现________________________。 具体原理是在农杆菌的Ti质粒上存在T-DNA片段，它具有可转移至受体细胞并整合到受体细胞_______________上的特点，因此只要将携带外源基因的DNA片段插入到_______________ (部位)即可。;(2)根据T--DNA这一转移特点，推测该DNA片段上可能含有控制______________________(酶)合成的基因。;(3)图中c过程中，能促进农杆菌向植物细胞转移的物质是___ 类化合物。;(4