3[1].2月季的花药培养.pptVIP

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课题2 月季的花药培养 一、课题目标: 说出被子植物花粉发育的过程及花药培养产生花粉植株的两种途径,说出影响花药培养的因素,学习花药培养的基本技术,尝试用月季或其他植物的花药进行培养。 二、课题重点和难点: 选取适宜的培养材料和培养基。 三、技能目标: 知道被子植物花粉发育的过程;说出产生花粉植株的两种途径;记住影响花药培养的因素,尝试花药培养的实验操作过程,并进行无菌操作;知道花药培养在育种上的意义。 一、自学导引: 阅读课本P37~P40,完成《优化设计》的自学导引。 1、基础知识 ------被子植物的花粉发育: (1)雄蕊由花丝和花药两部分组成。花药是雄蕊的主要部分,多数被子植物的花药由4个花粉囊组成,花粉囊外由囊壁包围,内生许多花粉粒。 当花粉囊的壁组织逐步发育分化时,会形成大量的花粉母细胞(小孢子母细胞)。 (2)花粉粒是由花粉母细胞经过减数分裂而形成,因此,花粉粒是单倍体的生殖细胞。花粉的发育要经历四分体时期、单核期和双核期等阶段。 实例一: 关于被子植物花粉发育的说法,不正确的是( ) A、花粉粒是在花药中的花粉囊里形成的 B、被子植物精子的形成是直接减数分裂的结果 C、被子植物的花粉的发育要经历四分体时期、单核期、双核期等阶段 D、花粉粒在发育过程中,核先位于细胞一侧,再移到细胞中央 基础知识 ------产生花粉植株的两种途径 途径一:花粉通过胚状体阶段发育为植株; 途径二:花粉在诱导培养基上先形成愈伤组织,再将其诱导分化成植株。 人工种子是由外植体通过组织培养而获得的胚状体,然后加上人造胚乳,人造种皮而制成;外植体进行的是有丝分裂,无须通过两性生殖细胞结合而发育成的个体,属于无性生殖。 基础知识 ------影响花药培养的因素 1、主要的影响因素:材料的选择与培养基的组成。 (1)接种的花药时期:一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧时,花药培养成功率最高。选择完全未开放的花蕾,可挑选到单核期的花药,菌少、易消毒;花瓣松动,菌多,消毒困难。 (2)此外,亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种密度对诱导成功率都有一定的影响。 实验操作 一、材料的选取 1、选择花药一般通过镜检来确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 2、确定花粉发育时期最常用方法:醋酸洋红法;焙花青-铬矾法。 注:花粉细胞核内有染色体,染色体主要由DNA和蛋白质组成,醋酸洋红为碱性染色剂,染色体容易被染色。通过染色,可以确定细胞核为单核期还是双核期,是单核居中期还是单核靠边期。一般单核靠边期的花药培养成功率最高。 二、材料的消毒 三、接种和培养 四、结果分析与评价 1、能够通过镜检找到处于适宜的发育期的花粉。用醋酸洋红法或焙花青-铬矾法检测单核靠边期的花粉粒。 2、花药出现污染的原因: (1)消毒不彻底;(2)接种室污染;(3)人为因素的交叉污染等。 3、略。 课后习题: 1、F2代紫色甜玉米的基因型组成可能为Aasusu或Aasusu。如果运用常规育种方法,将F2代中的紫色甜玉米与白色甜玉米(aasusu)进行测交,可以选择出基因型为AAsusu纯种紫色甜玉米。但这种方法比较繁琐,耗时较长,需要至少三年的选种和育种时间。如果利用花药离体培养的技术,在F1代产生的花粉中就可能有Asu的配子组合,再将花粉植株进行秋水仙素处理,使染色体加倍,就可以直接得到紫色甜玉米的纯合体(AAsusu)。这种方法可以大大缩短育种周期。 2、植物组织培养技术与花药培养技术的相同之处是:培养基配制方法、无菌技术及接种操作等基本相同。两者不同之处在于:花药培养的选材非常重要,需事先摸索时期适宜的花蕾,花药裂开后释放出的愈伤组织或胚状体也要及时更换培养基,对培养基配方的要求更为严格。这些都使花药培养的难度大为增加。 比较杂交育种、诱变育种、多倍体育种、单倍体育种 * * 注:花粉母细胞经减数分裂形成4个单核花粉粒,每个花粉粒的细胞核进行一次有丝分裂形成1个花粉管细胞核和1个生殖细胞核,每个生殖细胞核再进行一次有丝分裂生成2个精子。 BD 诱导配子直接发育成植株,再用秋水仙素加倍成纯合体 抑制细胞分裂中纺锤体的形成,使染色体数加倍后不形成两个细胞 用人工方法诱发基因突变,产生新性状和新品种 基因重组,把两亲本优良性状组合在同一后代中 原理 花药离体培养 用秋水仙素处理种子或幼苗 用射线、化学药品处理 杂交 处理 单倍体育种 多倍体育种 诱变育种 杂交育种 项目

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